彗星試驗方法的初步研究.pdf

1、彗星試驗(Comet assay)又稱單細(xì)胞凝膠電泳試驗(SCGE),是一種快速、靈敏的檢測單個細(xì)胞DNA斷裂的新技術(shù),由于其具備其它試驗無可比擬的優(yōu)越性,因此應(yīng)用前景十分廣泛.為了在該實驗室建立該方法,擴(kuò)展該方法在農(nóng)藥安全性評價中的應(yīng)用,該研究采用公認(rèn)的DNA斷裂劑重鉻酸鉀溶液為試驗材料,設(shè)5個試驗劑量,分別為12.5、25.0、50.0、100.0、500.0μmol/L,處理CHL細(xì)胞2個小時,然后對CHL細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞凝膠電泳試

2、驗.從細(xì)胞的彗星圖和試驗數(shù)據(jù)分析可以看出,隨著重鉻酸鉀溶液濃度的增大,彗星尾長明顯增長,說明重鉻酸鉀溶液劑量越大,對CHL細(xì)胞DNA的損傷越嚴(yán)重,且不同濃度重鉻酸鉀溶液與CHL細(xì)胞DNA損傷之間存在著明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系.這些結(jié)果表明在該實驗室條件下基本建立起來了該方法,并且找出了適合該實驗室條件下的CHL細(xì)胞彗星試驗方法的條件:最合適的制片條件,改良的細(xì)胞染毒方式,受試物處理CHL細(xì)胞時間至少為2小時,細(xì)胞裂解時間為2~2.5小時,D