Lipstatin的開發(fā)與研究.pdf

1、Lipstain是毒三素鏈霉菌產(chǎn)生的一種抑制胰脂肪酶活性的次級代謝產(chǎn)物.其四氫衍生物已經(jīng)開發(fā)成為一種新型的減肥藥物塞尼可.該文對lipstatin產(chǎn)生菌毒三素鏈霉菌進(jìn)行了菌種選育,對發(fā)酵條件及發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化,探索了毒三素鏈霉菌的原生質(zhì)體制備方法及質(zhì)粒抽提方法.利用雙氫鏈霉素作為一種篩選壓力,結(jié)合紫外線及NTG誘變方法對毒三素鏈霉菌進(jìn)行了篩選.結(jié)果表明,雙氫鏈霉素的加入有利于篩選得到Lipstatin高產(chǎn)菌株.對毒三素鏈霉菌的發(fā)酵工

2、藝進(jìn)行了優(yōu)化.確定了最佳發(fā)酵溫度為30℃,最優(yōu)初始pH為6.0,最佳搖瓶裝量為10％,最佳搖床轉(zhuǎn)速為220rpm;通過培養(yǎng)基的單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)最終確定最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:豆油5.0％,甘油2.0％,去脂黃豆粉3.0％,卵磷脂1.6％,MgSO<,4> 0.005％,ZnSO<,4> 0.01％.成功制備了毒三素鏈霉菌的原生質(zhì)體.考察了培養(yǎng)基組分、甘氨酸濃度、溶菌酶濃度、酶解溫度及酶解時間等因素對原生質(zhì)體的形成和再生的影響.通過質(zhì)粒