磁性納米復合顆粒的制備及其生物學應用研究.pdf

1、近年來隨著納米技術的快速發(fā)展，磁性納米顆粒特別是磁性納米復合顆粒，因具有尺寸小、比表面積大、表面活性高、生物相容性好、比飽和磁化強度高及在外磁場作用下快速響應等優(yōu)良特性，在生物醫(yī)學領域中受到廣泛應用，為生物分離和檢測方法提出了新的思路。
　　 本論文的主要內容是以不同的方法制備磁性復合顆粒并將其用于全血DNA的提取，通過對提取條件的優(yōu)化，最終適用于全自動化核酸提取工作站。并結合本實驗室在磁分離、化學發(fā)光、PCR技術基礎上建立起來

2、的檢測新技術，以乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)DNA為檢測對象進行了檢測方法的初探。具體內容包括:
　　 1.通過共沉淀法和細微乳液法成功合成了聚苯乙烯(PS)包埋的磁性復合顆?！狥e3O4/PS，并在其表面修飾SiO2，得到了Fe3O4/PS/SiO2磁性復合顆粒。由結果可知，F(xiàn)e3O4/PS/SiO2磁性復合顆粒具有明顯的核殼結構，大小均一，平均粒徑為450 nm，且具有超順磁性，飽和磁化強度為1

3、7.32 emu/g。
　　 2.采用改進的溶劑熱法制備Fe3O4磁性微球并經(jīng)過St(o)ber過程制備出Fe3O4/SiO2磁性復合顆粒，制備過程簡單，顆粒為圓球形，有明顯核殼結構，平均粒徑為700 nm，大小均一，分散性好，具有超順磁性，飽和強度為43.274 emu/g。
　　 3.通過對全血DNA提取條件的優(yōu)化，得出結果:當磁性復合顆粒用量為120μL(10 mg/mL)，裂解溫度為56℃，裂解時間為20 min

4、，洗脫體積為100μL時有最大提取量。并將優(yōu)化的體系與自動化核酸提取工作站相結合，提取的DNA經(jīng)凝膠電泳和PCR驗證，顯示良好的結果，為大樣本、高通量的提取全血DNA奠定了基礎。
　　 4.利用本實驗室已經(jīng)建立的基于磁分離、PCR擴增和化學發(fā)光的核酸檢測方法，以乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）DNA為檢測對象，比較了兩種不同磁性復合顆粒在HBV DNA檢測上的效果，最終結果顯示，在相同的實驗條件下，F(xiàn)e