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1、蛋白質(zhì)是一類具有生物活性的生物大分子,其離體后的穩(wěn)定性較差,在分離純化過程中極易變性,從而為提取分離具有生物活性的蛋白質(zhì)增加了難度。蛋白質(zhì)組學(xué)和蛋白質(zhì)工程研究的發(fā)展,對(duì)從復(fù)雜基體(如生物、醫(yī)藥和環(huán)境樣品)中溫和、高效、高選擇性地分離富集痕量蛋白質(zhì)的前處理技術(shù)提出了迫切要求。發(fā)展具有生物相容性的固相萃取新方法和新材料以實(shí)現(xiàn)復(fù)雜生物樣品中蛋白質(zhì)的分離和純化是解決當(dāng)前問題的一個(gè)可行方案。
本論文采用超枝化陽(yáng)離子聚合物非共價(jià)修飾多壁碳
2、納米管,改變了碳納米管表面的親水性和電荷性質(zhì),避免了共價(jià)接枝方法對(duì)碳納米管結(jié)構(gòu)的破壞或引入對(duì)蛋白質(zhì)具有非特異性吸附的基團(tuán),提高了碳納米管的分離性能。對(duì)聚合物修飾的多壁碳納米管進(jìn)行了紅外(FT-IR)、熱重(TGA)、透射電鏡(TEM)、Zeta電位等表征。
以超枝化陽(yáng)離子聚合物修飾的多壁碳納米管(BPEI-MWNTs)為固相吸附材料填柱,并與順序注射系統(tǒng)聯(lián)用,實(shí)現(xiàn)了在線選擇性分離富集牛血清白蛋白(BSA)。萃取前后的BSA經(jīng)過
3、圓二色光譜檢測(cè),證實(shí)從萃取柱表面回收的BSA沒有發(fā)生結(jié)構(gòu)變化。而且BPEI-MWNTs能夠?yàn)槲降鞍滋峁└嗟慕Y(jié)合位點(diǎn),能有效消除吸附層中蛋白質(zhì)之間的橫向排斥作用,從而有效增大了BPEI-MWNTs對(duì)BSA的吸附容量,即167mgg-1,是線性聚合物二甲基二烯丙基氯化銨修飾的多壁碳納米管(PDDA-MWNTs)萃取BSA方法的6倍。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,當(dāng)進(jìn)樣體積和洗脫體積分別為2.0mL和200μL時(shí),25μgmL-1牛血清白蛋白的保留效
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