基于納米多孔金電極為載體高靈敏度DNA傳感器的研制.pdf

1、本論文主要的研究?jī)?nèi)容是將納米多孔金、納米技術(shù)與核酸分子雜交技術(shù)相結(jié)合，研制高靈敏度高選擇性的新型DNA傳感器。這新型傳感器靈敏度高、迅捷而且操作簡(jiǎn)單，因此能夠廣泛應(yīng)用于生物分析領(lǐng)域。本文除了前言由四個(gè)部分組成： 1．我們用一種簡(jiǎn)單的方法制備納米多孔金，即通過(guò)硝酸腐蝕金銀合金，其中銀被硝酸溶解，而金原子不能溶解。由此得到的納米多孔金本身含有可導(dǎo)電的均勻多孔結(jié)構(gòu)，基于這種特性，將納米多孔金吸附到玻碳電極表面，就可以制備成納米多孔金電

2、極。 2．將納米多孔金箔腐蝕好，然后修飾到玻碳電極上。再將捕獲DNA固定到電極表面，雜交不同濃度的靶DNA，以[Co(phen)33+]為雜交指示劑，通過(guò)微分脈沖伏安法進(jìn)行檢測(cè)。交流阻抗法表征整個(gè)固定以及雜交過(guò)程的進(jìn)行。這種電化學(xué)DNA傳感器具有非常高的靈敏度，最低可以檢測(cè)靶DNA的濃度為3.82pM，同樣方法用裸金電極制備的傳感器的最低檢測(cè)限110pM。這種傳感器有助于發(fā)展生物傳感器檢測(cè)的快速篩選，檢測(cè)特殊序列，以及迅速確定和

3、量化下核酸序列的濃度。 3．構(gòu)建了納米多孔金電極為載體來(lái)固定探針DNA的生物傳感器，這是開(kāi)發(fā)新的生物傳感器和檢測(cè)關(guān)鍵的一步。DNA—金生物條形碼由于其放大功能被越來(lái)越多的納入生物測(cè)定，DNA—金生物條形碼就是在納米金膠修飾大量的核酸片段。與前面報(bào)道過(guò)納米金上接一種信號(hào)DNA不同，我們所用的金膠連接兩種DNA生物條形碼。一種與靶DNA互補(bǔ)，另一種是非互補(bǔ)的。這樣可以避免同一個(gè)納米金與靶互補(bǔ)DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。基于納米多孔金電極，多

4、重作用的金膠，以及Ru(NH3)6+為指示劑的多重放大功能，我們的傳感器的檢測(cè)限最低可達(dá)到28aM。 4．用21個(gè)堿基序列的肝炎病毒基因片段，以3—(2-吡啶)-5，6—苯基-1，2,4—三嗪為雜交指示劑構(gòu)建傳感器，首先分別用循環(huán)伏安法(CV)和微分脈沖伏安法(DPV)研究了DNA與PDTA的相互作用，我們構(gòu)建的DNA電化學(xué)生物傳感器，線性范圍5.87×10-7M-4.63×10-6M，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9990，檢測(cè)下限為3