雨生紅球藻中蝦青素的分離純化及異構體的分析研究.pdf

1、由于中草藥在治療疑難病癥顯示出獨特的作用,人們迫切需要建立一種快速有效的分離技術,對天然產物或藥物的有效成分進行分離和鑒定。但是,由于藥物分子同分異構體的理化性質極其相似,對有效成分異構體的分離和分析研究很困難。因此,利用高效液相色譜法對蝦青素的異構體進行分離和分析,是一項十分有意義的研究工作。本文的主要工作如下:1、本文以二氯甲烷與甲醇為溶劑,反復浸泡雨生紅球藻,對浸泡液皂化處理(皂化液為5％KOH-CH3OH)后,再經薄層層析,柱層

2、析,重結晶等分離純化處理,獲得了蝦青素的純品。2、分別采用超聲波破碎法,冷凍破碎法,研磨破碎法對新鮮雨生紅球藻的破壁工藝進行了探討。結果表明,超聲波破碎法適用于雨生紅球藻的細胞破壁,此法的最佳條件:超聲波功率315W,破壁時間20min。以丙酮為空白樣,采用分光光度法,測定出雨生紅球藻中蝦青素的含量可達到0.98%。3、利用高效液相色譜法對蝦青素純品的異構體進行了分析。分別從色譜柱,洗脫方式與流動相的選取,流動相配比與流速的確定,柱溫的

3、選擇等幾個方面對蝦青素異構體分離的色譜條件進行了優(yōu)化。優(yōu)化后的色譜條件:C30色譜柱(5μm,4.6×250mm),二氯甲烷和乙腈(1:1)為流動相,等度洗脫,檢測波長487nm,柱溫35℃,流速1mL/min。4、選用液質聯(lián)用方法對蝦青素的異構體進行了鑒定。液質聯(lián)用的條件:KromasilC18色譜柱(4.6μm,4.6×50mm),流動相為含有0.05%甲酸的乙腈和水(9:1),等度洗脫,檢測波長487nm,柱溫35℃,流速1mL/