羥基磷灰石-聚乳酸-羥基乙酸靜電紡復(fù)合納米纖維的制備與藥物輸送應(yīng)用研究.pdf

1、靜電紡納米纖維具有纖維尺寸可控、比表面積大、孔隙率高和獨特的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)等特點，可以很好地模擬天然細(xì)胞外基質(zhì)，在組織工程支架材料和藥物載體領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)具有良好的生物相容性和生物降解性。納米羥基磷灰石(n-HA)是一種很好的無機(jī)藥物載體材料，它具有高表面活性和較強(qiáng)的機(jī)械性能。本文制備了基于以上兩種材料的有機(jī)/無機(jī)靜電紡納米纖維雙載藥系統(tǒng)用于藥物緩釋研究。首先以抗生素類藥物阿莫西林(AMX)和抗腫瘤藥物鹽

2、酸阿霉素(DOX)為模型藥，分別負(fù)載在n-HA表面，并與PLGA紡絲液均勻混合，通過靜電紡絲技術(shù)分別制備AMX/n-HA/PLGA和DOX/n-HA/PLGA雙載藥納米纖維。然后研究了這種載藥體系的機(jī)械耐受性、載藥和釋藥性能、藥物活性以及生物相容性等特征，并探討了它們作為藥物載體材料或組織工程支架材料的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。
　　 本文第二章通過優(yōu)化AMX/n-HA的負(fù)載百分率，制備了AMX/n-HA/PLGA靜電紡復(fù)合載藥納米纖維

3、，研究了摻雜的AMX/n-HA對纖維直徑、表面孔隙率、親水性能以及機(jī)械性能等的影響，評價了AMX/n-HA/PLGA纖維氈的體外藥物釋放特性、抑菌活性及生物相容性和血液相容性。結(jié)果表明，當(dāng)n-HA和AMX的濃度分別為1 mg/mL和2 mg/mL時，負(fù)載百分率為20.45％;加入AMX/n-HA對PLGA纖維的形貌及纖維氈的孔隙率、親水性及內(nèi)部結(jié)構(gòu)沒有明顯的影響，而復(fù)合纖維直徑有明顯的降低，機(jī)械性能卻大大提高;有效地避免了藥物初始突釋現(xiàn)

4、象，并保持長期的緩慢釋放效果。定量和定性分析結(jié)果均表明其對金黃色葡萄球菌(S.aureus)有瞬時、長效和梯度抑菌活性;MTT法和細(xì)胞形貌表征表明其可以有效促進(jìn)L929細(xì)胞的粘附和增殖，即制備的AMX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維具有良好的體外生物相容性;溶血試驗結(jié)果也表明該材料具有很好的血液相容性。因此，該載藥纖維氈可以作為功能型組織工程支架的藥物緩釋載體，在傷口包覆、術(shù)后防粘連防感染方面有很好的潛在應(yīng)用價值。
　　 本文第

5、三章通過優(yōu)化DOX/n-HA的負(fù)載百分率，制備了DOX/n-HA/PLGA靜電紡納米載藥纖維，并分別對DOX/n-HA和DOX/n-HA/PLGA納米纖維進(jìn)行了一系列表征，評價了載藥纖維的緩釋行為、藥物抗腫瘤活性及血液相容性。結(jié)果表明，當(dāng)n-HA和DOX的濃度分別為0.5 mg/mL和1 mg/mL時，藥物負(fù)載百分率為43.2％;摻雜DOX/n-HA后，PLGA納米纖維直徑有所降低，機(jī)械性能得到提高;復(fù)合納米纖維在PBS(pH=7.4)

6、和醋酸鹽(pH=5.4)緩沖液中均具有很好的持續(xù)釋放效果，同時還表現(xiàn)出在腫瘤滋生的酸性微環(huán)境(pH=5.0～6.0)中的相對快速的釋放特性;且在實驗的藥物濃度范圍內(nèi)對人口腔上皮癌細(xì)胞（KB細(xì)胞）有明顯的殺傷力。因此，靜電紡DOX/n-HA/PLGA復(fù)合納米纖維抗腫瘤載藥體系在腫瘤治療領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用潛質(zhì)。
　　 由于多孔靜電紡納米纖維對染料的極強(qiáng)吸附作用，使得常規(guī)的MTT細(xì)胞毒性實驗有可能產(chǎn)生假陰性結(jié)果。因此有必要探索一種可靠

7、的評估靜電紡納米纖維的細(xì)胞生物相容性的技術(shù)。本文第四章系統(tǒng)地研究了應(yīng)用刃天青還原實驗(REMA)評價材料生物相容性的可能性。結(jié)果表明，未還原的刃天青在0.1 mg/mL時具有最高熒光強(qiáng)度。還原產(chǎn)物熒光強(qiáng)度在細(xì)胞濃度為0～50×104個/mL時表現(xiàn)出很好的線性關(guān)系，隨后依次遞減;在共培養(yǎng)時間0～10小時內(nèi)表現(xiàn)出二次增長曲線關(guān)系。同時納米纖維氈對刃天青還原產(chǎn)物沒有明顯吸附現(xiàn)象;該實驗結(jié)果表明，和MTT法相比，REMA法可以更加準(zhǔn)確地用于培養(yǎng)