油水界面合成Fe3O4納米顆粒及其在生物標(biāo)記中的應(yīng)用.pdf

1、熒光標(biāo)記技術(shù)是生物標(biāo)記中的重要標(biāo)記手段之一，近些年來(lái)磁性材料憑借其特殊的磁性能受到生物研究者的青睞。熒光材料和磁性材料的研究開(kāi)發(fā)，備受矚目。
　　 Fe3O4納米磁性材料作為一種新的材料，因具有特殊的物理化學(xué)性質(zhì)，如小尺寸效應(yīng)、表面與界面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)，表現(xiàn)出與常規(guī)磁性材料不同的性質(zhì)。近些年來(lái)，由于磁性納米材料在實(shí)際應(yīng)用中的廣泛前景，有關(guān)磁性納米顆粒制備方法的研究受到了很大的重視。目前制備水溶性納米顆粒的方法較多，但是合

2、成出來(lái)的顆粒仍存在著許多缺點(diǎn)，如粒徑均一性差，晶型不好，分散性差，合成方法復(fù)雜，容易氧化等等。目前本實(shí)驗(yàn)室利用油水界面法已經(jīng)成功制備出CdS，ZnS，NaYF4等納米顆粒，與此同時(shí)利用油水界面法合成油溶性的Fe3O4的報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)采用油水界面方法合成性質(zhì)良好Fe3O4納米顆粒。
　　 另外肝癌是一種高危險(xiǎn)性的惡性腫瘤，被稱為當(dāng)今世界的三大腫瘤殺手之一。因此，開(kāi)發(fā)一種快速而廉價(jià)的檢測(cè)方法，對(duì)提前預(yù)測(cè)肝癌并及時(shí)采取治療措施顯得尤

3、為必要。研究者認(rèn)為將熒光標(biāo)記技術(shù)和磁性材料結(jié)合起來(lái)，將會(huì)提高疾病診斷的靈敏性，降低診斷成本。在本課題組前期工作的基礎(chǔ)上，首先在低溫下油相中合成了NaYF4基質(zhì)材料并進(jìn)行稀土摻雜，然后運(yùn)用原位聚合法將水溶性高聚物聚丙烯酸(PAA)修飾到其表面，獲得了綜合性能更佳的NaYF4：Yb，Er/NaYF4/Polymer納米復(fù)合材料。本課題按照如下幾個(gè)方面展開(kāi)：
　　 首先利用油水界面法合成納米顆粒，探索堿液種類和濃度，表面活性劑類型和用

4、量，反應(yīng)溫度和時(shí)間，分散劑和助表面活性等因素對(duì)該體系的影響進(jìn)。生成的產(chǎn)物用XRD，F(xiàn)TIR，VSM，TEM，TGA進(jìn)行表征。結(jié)果表明：合成出來(lái)的是粒徑約為3.5 nm表面由油酸包覆，具有較強(qiáng)磁性油溶性的Fe3O4磁性納米顆粒。
　　 其次，本論文將兩種納米顆粒和BSA連接的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行探索，實(shí)驗(yàn)分別從以下四個(gè)因素進(jìn)行探索：最大連接劑用量，最大蛋白連接量。實(shí)驗(yàn)采用Lowory方法，檢測(cè)連接上蛋白的含量，進(jìn)而確定最佳條件。結(jié)果表明：

5、1M EDC用量：333μL；E/N配比：2:1；pH值：6.4；最大Pro(10 g/L BSA)連接量：300μL(NPs)，400μL(UNPs)。
　　 最后，本論文最后利用探索出的最佳連接條件，將兩種納米粒子和AFP兩種抗體Ig301，和Ig302連接，制備出免疫探針。采用SDS-PAGE電泳、FTIR、熒光分光光度計(jì)和Lowory方法進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，兩種抗體都成功連接在納米顆粒表面，其連接量為Ig301:1.