驅(qū)蟲斑鳩菊中紫鉚素的提取工藝研究.pdf

1、本文以驅(qū)蟲斑鳩菊成熟果實(shí)為原料，采用超聲輔助提取法、微波輔助提取法和超臨界CO2萃取法提取驅(qū)蟲斑鳩菊中的紫鉚素。結(jié)合單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)得出三種提取方法的最佳工藝參數(shù)。分析比較了三種提取工藝的優(yōu)缺點(diǎn)。考察了紫鉚素提取液與補(bǔ)骨脂素提取液對人黑素瘤細(xì)胞A375酪氨酸酶活性及黑素生成的影響。
　　 首先，采用超聲輔助提取法提取驅(qū)蟲斑鳩菊中的紫鉚素。對超聲提取過程中影響提取率的因素進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)和中心組合實(shí)驗(yàn)，得出最佳的超聲輔助

2、提取工藝:驅(qū)蟲斑鳩菊果實(shí)粉末100-120目，提取溶劑64％乙醇，液固比12.7 mL/g，超聲提取時(shí)間46min，最佳工藝條件下紫鉚素提取率的預(yù)測值為0.391 mg/g，實(shí)際值為0.384 mg/g。采用Design-Expert8.0.6軟件擬合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，建立了超聲輔助提取驅(qū)蟲斑鳩菊中紫鉚素的數(shù)學(xué)模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明超聲輔助提取法的實(shí)驗(yàn)效果優(yōu)于常規(guī)溶有機(jī)溶劑提取法。
　　 其次，采用微波輔助提取法提取驅(qū)蟲斑鳩菊中的紫鉚素。

3、對微波提取過程中影響提取率的因素進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)和中心組合實(shí)驗(yàn)，得出最佳的微波輔助提取工藝:驅(qū)蟲斑鳩菊果實(shí)粉末100-120目，破壁助劑69％乙醇，破壁助劑用量12 mL，微波輻射時(shí)間40 s，微波功率336W，回流提取溫度69℃，回流提取時(shí)間59 min，液固比14 mL/g，最佳工藝條件下紫鉚素提取率的預(yù)測值為0.401 mg/g，實(shí)際值為0.405 mg/g。采用Design-Expert8.0.6軟件擬合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，建立了微波輔助提

4、取驅(qū)蟲斑鳩菊中紫鉚素的數(shù)學(xué)模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明微波輔助提取法的實(shí)驗(yàn)效果優(yōu)于常規(guī)溶有機(jī)溶劑提取法。
　　 再次，采用超臨界CO2萃取法提取驅(qū)蟲斑鳩菊中的紫鉚素。對超臨界CO2萃取過程中影響提取率的因素進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)和中心組合實(shí)驗(yàn)，得出最佳的超臨界CO2萃取工藝:驅(qū)蟲斑鳩菊果實(shí)粉末100-120目，夾帶劑80％乙醇，夾帶劑用量20 mL，靜態(tài)浸取時(shí)間1.5 h，動(dòng)態(tài)浸取時(shí)間1.5 h，萃取溫度46℃，萃取壓力30MPa，CO2流量1

5、1 g/min，最佳工藝條件下紫鉚素提取率的預(yù)測值為0.281 mg/g，實(shí)際值為0.286 mg/g。采用Design-Expert8.0.6軟件擬合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，建立了超臨界CO2萃取驅(qū)蟲斑鳩菊中紫鉚素的數(shù)學(xué)模型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明超臨界CO2萃取法的實(shí)驗(yàn)效果優(yōu)于常規(guī)溶有機(jī)溶劑提取法。
　　 最后，從紫鉚素提取率、提取液純度、工藝操作可行性及其對環(huán)境的影響等方面，對超聲輔助提取工藝、微波輔助提取工藝、超臨界CO2萃取工藝進(jìn)行分析和比

6、較。綜合考慮得出，微波輔助提取工藝更優(yōu)于其它兩種工藝，更適合工業(yè)化生產(chǎn)。
　　 另外，本文采用酶學(xué)法研究紫鉚素提取液與補(bǔ)骨脂素提取液對人惡性黑色素瘤細(xì)胞A375酪氨酸酶活性的影響，采用四甲基噻唑氮藍(lán)(MTT)法結(jié)合光鏡測定提取液對細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞增殖的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:紫鉚素提取液與補(bǔ)骨脂素提取液聯(lián)合作用于人惡性黑素瘤細(xì)胞A375時(shí)，有利于增強(qiáng)酪氨酸酶活性，促進(jìn)黑色素合成，為驅(qū)蟲斑鳩菊與補(bǔ)骨脂聯(lián)合應(yīng)用于治療白癜風(fēng)的可行性提供了實(shí)