發(fā)酵法生產(chǎn)低聚半乳糖技術(shù)的研究.pdf

1、低聚半乳糖(Galactooligosaccharide,簡稱GOS),是指在乳糖的半乳糖的一側(cè)鏈接1～4個(gè)半乳糖分子,屬于葡萄糖和半乳糖組成的雜低聚糖,其分子式可表示為(Ga1)n-Glu。因低聚半乳糖具有特殊的理化性質(zhì),引起越來越廣泛的關(guān)注,應(yīng)用領(lǐng)域不斷拓寬,其開發(fā)研究前景廣闊。
　　低聚半乳糖的生產(chǎn)方法主要?dú)w為三類,分別是化學(xué)法、酶法和發(fā)酵法。酶法生產(chǎn)低聚半乳糖主要分為三種方法,分別是游離酶促反應(yīng)、固定化酶連續(xù)反應(yīng)、非水相酶

2、反應(yīng),因其生產(chǎn)低聚半乳糖的產(chǎn)量較高,且環(huán)境污染小,目前在工業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用最廣泛、技術(shù)最為成熟。發(fā)酵法生產(chǎn)低聚半乳糖的研究比較少,本文的研究重點(diǎn)即為利用發(fā)酵的方法研究全細(xì)胞微生物生產(chǎn)低聚半乳糖的技術(shù)。
　　本文的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是,將以乳糖為唯一碳源,X-gal為顯色劑的平板作為篩選培養(yǎng)基,從變質(zhì)的牛奶、土壤等材料中,經(jīng)過初篩和進(jìn)一步的復(fù)篩,篩選獲得一株低聚半乳糖的產(chǎn)生菌,綜合其形態(tài)學(xué)特征、生理生化特征及18S rDNA序列同源分析結(jié)果

3、,將其鑒定成為斜臥青霉(Penicillium decumberns)。通過正交實(shí)驗(yàn),對菌株生產(chǎn)低聚半乳糖的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。研究了pH值、溫度、乳糖濃度、發(fā)酵時(shí)間等因素對該菌株全細(xì)胞以乳糖為唯一碳源生成低聚半乳糖的影響,最優(yōu)化反應(yīng)的轉(zhuǎn)糖基產(chǎn)物經(jīng)TLC、HPLC分析,確定該菌株具有生產(chǎn)低聚半乳糖的能力,產(chǎn)量在31.883g/L-46.793g/L之間。并對其進(jìn)行了初步的發(fā)酵動(dòng)力學(xué)研究,最優(yōu)發(fā)酵條件為:裝料量3.0L,接種量20％,培養(yǎng)溫