甘肅省中西部地區(qū)鐮孢菌的分類研究.pdf

1、鐮孢菌屬(Fusarium Link)是真菌中的一個重要類群，普遍存在于土壤和動植物有機體中。其中許多種類是重要的植物病原菌，可侵染多種經濟作物，導致作物減產和引起巨大的經濟損失。甘肅省位于我國西部，其鐮孢菌種類資源豐富。雖然過去曾有許多學者對甘肅省內的鐮孢菌進行過不同程度的分類學和病理學研究，但以現(xiàn)代的鐮孢菌分類系統(tǒng)觀點對該屬真菌開展的研究還很有限。因此，作者根據(jù)現(xiàn)代鐮孢菌分類系統(tǒng)，在傳統(tǒng)形態(tài)分類學基礎上，對甘肅省內的鐮孢菌進行了系統(tǒng)

2、研究，目的是明確甘肅省發(fā)生的鐮孢菌屬真菌的種類和多樣性分布特點，為鐮孢菌病害的正確病原鑒定及科學防治提供理論依據(jù)。 在2006～2007年間，在甘肅省包括高寒草地在內的23個市、縣、鎮(zhèn)的主要作物產區(qū)，采集不同植物及其根際土壤標樣，采用常規(guī)的方法對各個樣品進行真菌分離，共得到862個鐮孢菌菌株，根據(jù)培養(yǎng)和形態(tài)學特征鑒定出16種鐮孢菌。采用rDNA ITS和EF-1α序列分析的方法對疑難鐮孢菌株進行了比較研究，進一步明確了這些鐮孢菌

3、的分類地位。另外，采用ISSR-PCR分子標記技術對來自甘肅省的89株木賊鐮孢菌進行了遺傳多樣性分析。研究結果如下： (1)根據(jù)培養(yǎng)和形態(tài)學特征鑒定出的16種鐮孢菌為木賊鐮孢(F.equiseti)、尖鐮孢(F.oxysporum)、腐皮鐮孢(F.solani)、銳頂鐮孢(F.acuminatum)、芬芳鐮孢(F.redolen+s)、輪枝鐮孢(F.verticillioides)、大刀鐮孢(F.culmorum)、層出鐮孢(F

4、.proliferatum)、半裸鐮孢(F.semitectum)、彎角鐮孢(F.camptoceras)、磚紅鐮孢(F.lateritium)、三線鐮孢(F.tricinctum)、燕麥鐮孢(F.avenaceum)、接骨木鐮孢(F.sambucinum)、膠孢鐮孢(F.subglutinans)和克魯克威爾鐮孢(F.crookwellense)。 (2)在分離獲得的鐮孢菌中，分離頻率最高的4個種依次是木賊鐮孢(F.equis

5、eti)、尖鐮孢(F.oxysporum)、腐皮鐮孢(F.solani)以及銳頂鐮孢(F.acuminatum)，分離頻率分別占總鑒定菌株總數(shù)的29.93％、28.54％、12.18％和10.09％。其他分離鑒定的鐮孢菌包括芬芳鐮孢(F.redolens)、輪枝鐮孢(F.verticillioides)、大刀鐮孢(F.culmorum)、層出鐮孢(F.proliferatum)、半裸鐮孢(F.semitectum)和彎角鐮孢(F.cam

6、ptoceras)，這些鐮孢菌的分離頻率低于10％，但高于1％。分離頻率低于1％的鐮孢菌包括磚紅鐮孢(F.lateritium)、三線鐮孢(F.tricinctum)、燕麥鐮孢(F.avenaceum)、接骨木鐮孢(F.sambucinum)、膠孢鐮孢(F.subglutinans)和克魯克威爾鐮孢(F.crookwellense)。 (3)16種鐮孢菌中的優(yōu)勢種為木賊鐮孢和尖鐮孢，其分布幾乎覆蓋在甘肅省的所有市、縣；其次是銳頂

7、鐮孢和腐皮鐮孢，它們分別分布于12個和10個市、縣；芬芳鐮孢和大刀鐮孢分布于8個和5個市、縣，其余10個種的分布地區(qū)較少，均在5個市、縣以下，其中膠孢鐮孢和克魯克威爾鐮孢兩個種只在蘭州 1個市發(fā)現(xiàn)，而接骨木鐮孢只在酒泉市分離得到2株。 (4)采用EF-1α和rDNAITS序列分析方法對6株疑難鐮孢菌株進行了研究，經與GenBank中已知菌株序列對比，最后分別確定為層出鐮孢(F.proliferatum)1株，芬芳鐮孢(F.red

8、olens)1株，尖鐮孢(F.oxysporum)1株，銳頂鐮孢(F.acuminatum)1株，腐皮鐮孢(F.solani)2株。 (5)采用ISSR指紋圖譜分析技術，對來自甘肅不同地區(qū)的89株木賊鐮孢菌的基因組DNA的遺傳多樣性進行了研究。從供試21個引物中篩選出3個引物，并進行擴增和分析。采用NYSTS2.10e軟件對矩陣進行遺傳分析，形成聚類圖。在相似系數(shù)為0.675時，可將試驗菌株分為6個類群。圖譜分析結果表明，ISS