基于毛細管電泳的用于三磷酸腺苷檢測的氧化石墨烯-適配體傳感器.pdf

1、作為一種新型的熒光納米材料，量子點具有傳統(tǒng)有機熒光染料所不具備的一些獨特的光學性質(zhì)，因此近年來，量子點被廣泛關(guān)注。它在熒光探針、細胞標記、生物傳感器、醫(yī)學影像等多個領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用?；诖耍疚膶⒘孔狱c表面修飾上對ATP具有特異性識別和結(jié)合能力的適配體，并利用適配體與氧化石墨烯（GO）之間強的吸附作用和氧化石墨烯一起構(gòu)建一個基于毛細管電泳的檢測三磷酸腺苷的氧化石墨烯-適配體傳感器，論文具體完成的工作如下：
　?。?）用新制備的α

2、-二氫硫辛酸通過配體置換的方式將油溶性量子點轉(zhuǎn)換成水溶性量子點，并用EDC作偶聯(lián)劑制備量子點-適配體熒光探針（QD-aptamer）。通過不同的方法對其進行了多種表征，如紫外-可見吸收光譜、熒光發(fā)射光譜，毛細管電泳、動態(tài)光散射、Zeta電位等。結(jié)果發(fā)現(xiàn)QD-aptamer的紫外-可見吸收光譜在260nm處出現(xiàn)明顯吸收峰，并且該熒光探針的發(fā)射光譜相較于裸的量子點有5nm的紅移，這可能是由于量子點與核酸適配體的連接導致顆粒尺寸變大的緣故，從

3、動態(tài)光散射的結(jié)果中也可以得到相同的結(jié)論；從毛細管電泳圖譜結(jié)果中我們可以發(fā)現(xiàn)在相同的條件下，不同樣品的遷移時間出現(xiàn)了相應(yīng)的變化，這些都說明成功制得了QD-aptamer。
　　（2）將不同濃度的QD-aptamer與固定濃度的GO溶液混合，以確定固定濃度GO最大程度吸附QD-aptamer時該熒光探針的濃度。實驗結(jié)果表明，當GO與QD-aptamer終濃度分別是0.1μg/mL和300nmol/L時，QD-aptamer的熒光可以被

4、GO完全淬滅。
　　（3）本文在確定GO最大吸附 QD-aptamer熒光探針濃度后，向上述混合液中加入不同濃度的三磷酸腺苷（ATP）溶液，用毛細管電泳技術(shù)探究 ATP濃度對探針的熒光恢復(fù)程度的影響。實驗結(jié)果表明，ATP濃度在25-1500nmol/L范圍內(nèi)與熒光恢復(fù)強度存在良好的線性關(guān)系，R=0.9849，其檢出限為10nmol/L。
　?。?）本文利用該生物傳感器對小鼠纖維細胞系 NIH-3T3及人宮頸癌細胞系HeLa細