牛血吸蟲(chóng)病分子ELISA診斷方法的建立和應(yīng)用.pdf

1、分類 號(hào)華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩 士學(xué)位 論文牛血 吸蟲(chóng)病 分子 E L ls A 診 斷方法 的建立和應(yīng)用D ev elo P m e n ta n dA P P lica tio no fM o le e u la rE L IS AM eth o dfo rD ia g n o sin gB o v in eS e h isto so m ia sis研 究 生 : 李 友指 導(dǎo) 教 師 : 趙俊龍 教授指 導(dǎo) 小 組 : 趙俊 龍 教授

2、姚 寶安 教授周艷 琴 副教授專業(yè) : 預(yù) 防獸醫(yī)學(xué)獲 得 學(xué)位 名稱 : 農(nóng) 學(xué)碩士研 究 方 向 : 寄生 蟲(chóng)免疫獲得學(xué)位 時(shí) 間: 2008 年 6 月華 中農(nóng)業(yè) 大學(xué)動(dòng)物 醫(yī)學(xué) 院/農(nóng) 業(yè)微 生物 國(guó)家重 點(diǎn)實(shí)驗(yàn) 室二 0 0 八年 六 月牛血吸蟲(chóng)病 分子 E U SA 診斷方法的建立和應(yīng)用3. 3. 1rLHD 一 sj23一 G ST 間接 E LISA 方法的建立 . . . . . . . . . . . . . . .

3、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …563. 3. 2rFusfon一 G ST 間接 E U SA 方法的建立 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …643. 4 討論 . . .

4、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …693

5、. 4.1rLH D 一 sj23 一 G ST 間接 E LISA 診斷方法 的建立 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …703. 4.2rFusion一 G ST 間接 E U SA 診斷方法 的建立 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

6、. . . . . . . . . . . . … …703. 5 小結(jié) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

7、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……71第 四章 牛 日本血吸蟲(chóng) 的人工感染與重感染及血清抗體 的變化規(guī)律 . . . . . . . . . . . . . . . … …724 . 1 目的和意 義 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

8、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …724.2 實(shí)驗(yàn)材料 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

9、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …724.2. 1 試驗(yàn)動(dòng)物 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

10、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …734.2.2 感染材料 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

11、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …734.2. 3 試 驗(yàn) 儀器 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

12、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …734.2.4 試 驗(yàn) 藥 品及試 劑. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

13、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……734.2. 5 牛感染血 吸蟲(chóng)后不 同時(shí)期 的血清 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……734.2.6E L ISA 檢測(cè)方法 中所 需的試劑和器材 .

14、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …734.3 試 驗(yàn) 方 法 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

15、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……734.3. 1 日本血吸蟲(chóng)尾蝴貼片法感染試驗(yàn) 牛. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

16、 . . . . . . . … …734. 3. 2 糞孵法查毛拗. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … ， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …734.3. 3 環(huán) 卵沉

17、淀試 驗(yàn)檢測(cè)血 清抗 體. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …744.3. 4 感 染 前后 生理 生化 指 標(biāo) 的監(jiān) 測(cè) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

18、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……744. 3. 5 血清抗體 的檢測(cè)方法. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

19、. . . . . . . . . . . . . . . . . … …744.4 結(jié)果與分析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

20、 . . . . . . . . . . . . … …744.4.1 試驗(yàn) 牛感染血 吸蟲(chóng)后 臨床 癥狀 的變化 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …744.4.2 糞孵 毛拗 的結(jié)果. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

21、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……744.4.3 環(huán) 卵沉 淀試驗(yàn) 的結(jié)果 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

22、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……754.4.4 生理 生化 指標(biāo) 的監(jiān) 測(cè) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

23、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……764.4.5 牛初次感染 日本血吸蟲(chóng)后血清抗體的變化規(guī)律. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …894.4. 6 6# 小牛 出生后體 內(nèi)母源抗 體 的變化規(guī)律 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

24、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……944.4. 7 牛重感染 日本血吸蟲(chóng)后血清抗體的變化規(guī)律. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …954. 5 討 論 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

25、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……994. 5. 1 牛 日本血吸蟲(chóng)病 的人工復(fù)制. . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

26、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …994. 5. 2 生理 生化 指標(biāo) 的變 化 與 日本血 吸蟲(chóng)病 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

27、. . . … …994. 5. 3 糞孵 毛拗 法和 環(huán) 卵沉 淀試驗(yàn) 與 日本血 吸蟲(chóng)病 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …994. 5. 4 試 驗(yàn) 牛感 染 與重感染 日本血 吸蟲(chóng)后抗 體變化 的差異. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 1004.

28、5. 5 小牛母源抗 體 的變 化規(guī)律 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 1004.6 小 結(jié) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .