轉(zhuǎn)GL融合蛋白基因水稻非預(yù)期成分分析與谷蛋白急性毒理研究.pdf

1、我國是農(nóng)業(yè)大國，將轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)化為巨大生產(chǎn)力，將有利于我國農(nóng)業(yè)的發(fā)展。但是，在將轉(zhuǎn)基因水稻及其產(chǎn)品進(jìn)行商業(yè)化生產(chǎn)之前，需要對其做毒理安全性評價，以規(guī)范轉(zhuǎn)基因水稻的商業(yè)化及其生產(chǎn)。本文主要從轉(zhuǎn)GL基因稻米谷蛋白急性經(jīng)口毒性實驗及轉(zhuǎn)GL基因水稻的非預(yù)期性成分分析方面對轉(zhuǎn)GL基因稻米的食用情況進(jìn)行分析，以期為其今后的深入研究及商業(yè)化生產(chǎn)提供參考。
　　 本文利用蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究了轉(zhuǎn)GL融合蛋白基因水稻與其對照受體種子中總蛋白的表達(dá)差

2、異情況，共鑒定了28個差異蛋白點，得到了16個受GL融合蛋白基因響應(yīng)的蛋白。這些蛋白參與了碳水化合物代謝、酯代謝、維生素代謝、多糖生物合成及代謝、蛋白質(zhì)生物合成、脅迫進(jìn)程、免疫系統(tǒng)、種子貯藏等過程。這些蛋白均是首次發(fā)現(xiàn)受GL融合蛋白基因響應(yīng)的蛋白。
　　 采用低堿(0.35％)提取轉(zhuǎn)GL融合蛋白基因水稻谷蛋白。根據(jù)蛋白電泳確定目的谷蛋白的等電點后，利用等電點法沉淀谷蛋白，再冷凍干燥得到灰白色蛋白粉。冷凍干燥得到的蛋白粉研磨后過2

3、00目篩，用于后續(xù)的急性毒理學(xué)試驗。
　　 急性毒性試驗可以評價轉(zhuǎn)GL基因水稻對機(jī)體的急性毒性大小。本試驗采用5000mg/kg的最大灌胃量對ICR小鼠進(jìn)行灌胃，灌胃后連續(xù)觀察14d，受試小鼠未見明顯的中毒癥狀和不良反應(yīng)，也未發(fā)生小鼠死亡的現(xiàn)象。實驗結(jié)束后，小鼠的血常規(guī)指標(biāo)中，轉(zhuǎn)GL基因谷蛋白與親本稻米谷蛋白相比無顯著性差異。臟器系數(shù)中，轉(zhuǎn)GL基因谷蛋白與親本稻米谷蛋白相比無顯著性差異。并且，小鼠灌胃轉(zhuǎn)基因谷蛋白的最大耐受量(M