以多聚賴氨酸為載體的雙酚A包被抗原制備及其免疫分析研究.pdf

1、雙酚A(BPA)是一種內分泌干擾物，影響生殖系統(tǒng)的發(fā)育。雙酚A還可導致前列腺癌、神經(jīng)系統(tǒng)和胰腺功能混亂。雙酚A是一種重要的有機化工原料，被用于生產(chǎn)環(huán)氧樹脂與聚碳酸酯類產(chǎn)品，而這兩類產(chǎn)品在食品包裝、食具、塑料瓶等方面應用廣泛。雙酚A在一定條件下會因溶出、遷移和排放等原因進入生態(tài)環(huán)境，進而對人體健康造成潛在危害。為此，建立一種快速檢測雙酚A的方法具有十分重要的意義。
　　 本文利用雙酚A結構類似物為半抗原，采用碳二亞胺法將雙酚A半抗

2、原與牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)等載體偶聯(lián)合成雙酚A免疫抗原，再將雙酚A半抗原與多聚賴氨酸(PLL)、雞血清白蛋白(OVA)偶聯(lián)制備包被抗原。用雙酚A免疫抗原免疫新西蘭兔，以制備其多克隆抗體。選取最佳的免疫抗原免疫Balb/c鼠，取其脾細胞與骨髓瘤細胞細胞SP2/0融合，經(jīng)多次亞克隆篩選出高性能的單克隆細胞株。分別利用制備的多克隆抗體和單克隆抗體，建立了雙酚A免疫分析方法。
　　 利用雙酚A多克隆抗體，優(yōu)化免疫

3、分析條件，分別建立檢測雙酚A的酶聯(lián)免疫分析吸附法和熒光免疫分析法。建立的酶聯(lián)免疫分析方法線性范圍為1.3ng/mL～292.2ng/mL，最低檢測限是0.5ng/mL，樣品加標回收率為86.7％～109.2％。用酶聯(lián)免疫分析法研究西洋菜對雙酚A的去除能力，結果表明對其去除效果較好。熒光免疫分析的的線性范圍為2.4ng/mL～1279.5ng/mL，最低檢測限是0.8ng/mL，樣品回收率為89.3％～110.6％。由此可知，建立的酶聯(lián)免