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1、電化學(xué)生物傳感技術(shù),因其價(jià)格低廉、靈敏度高以及易于自動(dòng)化、微型化的優(yōu)點(diǎn),被認(rèn)為是一種有著廣闊發(fā)展前景的分析測(cè)試方法。本論文以葡萄糖和黃曲霉毒素B1(AflatoxinB1,AFB1)為研究對(duì)象,用玻碳電極(GlassyCarbonElectrode,GCE)、金電極作為基礎(chǔ)電極,利用生物電化學(xué)傳感技術(shù),分別制備了葡萄糖的酶?jìng)鞲衅鳌ⅫS曲霉毒素B1的免疫傳感器及DNA損傷傳感器。
本論文的主要工作包括:
1.固定在大孔有
2、序SiO2泡沫修飾GCE上葡萄糖氧化酶的直接電化學(xué)
以修飾GCE為基礎(chǔ),確定了用葡萄糖氧化酶@大孔SiO2修飾方法作為實(shí)現(xiàn)葡萄糖氧化酶直接電化學(xué)的修飾方法。論文通過(guò)一系列的實(shí)驗(yàn)選擇確定修飾電極的最適條件,最后確定該修飾電極的最適PBS緩沖溶液的pH值為7.0,最適葡萄糖氧化酶修飾濃度為550UmL-1,最適的大孔SiO2的修適量為7μg。用電流-時(shí)間曲線(i-t曲線)得到了葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線,其線性方程為i(μA)=3.205C
3、+1.067,相關(guān)性系數(shù)R為0.999,線性檢測(cè)范圍為50~1850μmolL-1,表觀米氏常數(shù)為2.073mmolL-1。
2.AFB1單克隆抗體修飾金電極制備AFB1免疫傳感器
制備了快速檢測(cè)黃曲霉毒素B1的黃曲霉毒素B1抗體@納米金修飾金電極電化學(xué)傳感器單元。實(shí)驗(yàn)選用交流阻抗圖譜(EIS)、循環(huán)伏安法(CV)和示差脈沖伏安法(DPV)研究黃曲霉毒素B1在修飾電極上的電化學(xué)響應(yīng),確定了該傳感器測(cè)定黃曲霉毒素B1的
4、最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件(黃曲霉毒素B1單克隆抗體的最適修飾條件為4℃、8h,PBS緩沖溶液的最適pH值為7.4),建立了測(cè)定黃曲霉毒素B1的電化學(xué)方法,其線性方程為:i(μA)=0.02166C+18.8682,線性相關(guān)系數(shù)R=0.9997;線性檢測(cè)范圍為1.427~150ngmL-1,對(duì)不同豬飼料樣品檢測(cè)的加標(biāo)回收率在94.44~101.36%。
3.DNA自組裝損傷傳感器檢測(cè)黃曲霉毒素
以ss-DNA修飾金電極為基礎(chǔ),以亞
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