青島海域海洋真菌生物活性初探.pdf

1、植物病蟲害可造成農(nóng)作物毀滅性危害，采用化學(xué)農(nóng)藥防治植物病害已成為國內(nèi)外保證農(nóng)作物高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的重要措施。但是由于化學(xué)農(nóng)藥的大量使用，生態(tài)環(huán)境污染、食品安全隱患隨之而來，最重要的是很多農(nóng)業(yè)病蟲害在長期的抗農(nóng)藥過程中形成了不同程度的耐藥性與抗藥性。因此，不僅對于山東這個(gè)農(nóng)業(yè)大省、甚至全國或者全球來說，環(huán)境友好型的新型農(nóng)藥研發(fā)問題亟待解決。新資源海洋真菌代謝產(chǎn)物的研究對具有新穎結(jié)構(gòu)和環(huán)境友好型農(nóng)用抑菌活性物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)具有重要意義。本論文實(shí)驗(yàn)旨在從海

2、洋生物中分離純化并篩選出具有較好抑菌活性的海洋真菌菌株。
　　本論文實(shí)驗(yàn)的海洋生物樣品均采集自青島海域，根據(jù)菌株形態(tài)不同，使用組織分離法分離純化出42株海洋內(nèi)生真菌，其中海洋動物源真菌24株，海洋植物源真菌18株。選取不同來源的菌落形態(tài)特異的10株真菌菌株進(jìn)行優(yōu)化培養(yǎng)，并分別提取菌株的胞內(nèi)和胞外次級代謝產(chǎn)物，濃縮成浸膏，便于進(jìn)行海洋真菌生產(chǎn)力、產(chǎn)物豐富度以及生物活性篩選。
　　在生產(chǎn)力篩選過程中，發(fā)現(xiàn)四種培養(yǎng)基中以RICE培

3、養(yǎng)基的生產(chǎn)力最大。在產(chǎn)物豐富度的TLC篩選過程中，發(fā)現(xiàn)同一菌株的同一培養(yǎng)基，培養(yǎng)液（胞外）與菌絲體（胞內(nèi)）的代謝產(chǎn)物不同;同一菌株的不同培養(yǎng)基次級代謝產(chǎn)物差異性較大，說明外界條件的改變會影響海洋真菌的次級代謝過程。其中，海洋動物源菌株05-A的RICE培養(yǎng)基次級代謝產(chǎn)物豐富，海洋植物源菌株21-A的MH1培養(yǎng)基的發(fā)酵液中次級代謝產(chǎn)物豐富。
　　在生物活性篩選過程中，以四株病原細(xì)菌為指示菌株，采用濾紙片擴(kuò)散法對于10株海洋真菌的次級

4、代謝產(chǎn)物進(jìn)行抗細(xì)菌活性測定，結(jié)果表明:海洋動物源真菌菌株02-A表現(xiàn)出抑菌廣譜性，其中對大腸埃希式桿菌(E.C.)抑制效果最好，抑菌圈達(dá)到19mm（陽性對照為30mm）;海洋植物源真菌菌株21-A抑菌作用具有專一性，對大腸埃希式桿菌(E.C.)有很強(qiáng)的抑制作用，最大抑菌圈可達(dá)23mm（陽性對照為30mm）;十株供試樣品均對大腸埃希式桿菌(E.C.)均有不同程度的抑制作用。同時(shí)，使用4株植物病原真菌作為指示菌株，采用平板對峙法對11株形態(tài)