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1、DHA,俗稱腦黃金,是一種具有重要生理功能的多不飽和脂肪酸,有預(yù)防心血管疾病、抗炎抗過敏和抗癌等功能,其傳統(tǒng)的來源主要是脂肪酸含量較高的深海魚類,目前,微生物發(fā)酵生產(chǎn)DHA,因其具有多種優(yōu)勢,被廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),裂殖壺菌(Schizochytrium)因具有較強的生產(chǎn)DHA能力,已被廣泛用于DHA發(fā)酵生產(chǎn)。本文主要圍繞從裂殖壺菌體內(nèi)提取具有生理活性的DHA的方法展開研究,如何快速、高收率從裂殖壺菌菌體制備DHA油脂,是影響DHA產(chǎn)量
2、的關(guān)鍵步驟之一。本文首先研究了不同破壁方法對DHA提取的影響,確定了生物酶法破壁效果最好,進一步對比不同酶的酶解效果,確定了堿性蛋白酶為裂解細(xì)胞的最佳酶。在此基礎(chǔ)上,以油脂的得率和DHA得率為指標(biāo),確定酶解的最適條件,研究了酶解液的循環(huán)使用,結(jié)果如下:
?。?)比較了5種破壁方法對油脂得率的影響,其中真空冷凍干燥后提取法和噴霧干燥后提取法油脂的得率低于15%,酸熱法和機械破壁法的得率均低于30%,而生物酶法油脂得率為73.90%
3、,確定了生物酶法為裂殖壺菌細(xì)胞油脂提取最佳方法。
?。?)比較研究了中性纖維素酶、酸性纖維素酶和堿性蛋白酶的酶解破壁效果,結(jié)果表明,堿性蛋白酶組的油脂得率為71.46%,DHA得率為77.25%,酸性纖維素酶組油脂的得率和DHA得率均未檢出,中性纖維素酶組的油脂得率為31.40%,DHA得率為71.26%,堿性蛋白酶組DHA和油脂得率高于其他的酶,因此,確定堿性蛋白酶為細(xì)胞破壁的最佳酶,且堿性蛋白酶裂解細(xì)胞主要是在0.5h內(nèi),其
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