阿昔洛韋中基因毒性物質(zhì)的檢測(cè)及2-3水合物晶型的制備研究.pdf

1、阿昔洛韋(ACV)是一種重要的抗病毒藥物，主要用于治療單純皰疹病毒所引起的各種感染。在阿昔洛韋質(zhì)量研究中，總結(jié)發(fā)現(xiàn)阿昔洛韋合成工藝中使用的一種催化劑對(duì)甲苯磺酸屬于基因毒性物質(zhì)，在阿昔洛韋中的殘留應(yīng)控制在3ppm以下。因此有必要建立一種靈敏度高、重復(fù)性好的檢測(cè)方法用于檢測(cè)阿昔洛韋產(chǎn)品中對(duì)甲苯磺酸的殘留。此外阿昔洛韋存在6種晶型，相比其他幾種晶型，阿昔洛韋2/3水合物具有更好的生物利用度和臨床療效，需要對(duì)阿昔洛韋2/3水合物晶型的制備方法進(jìn)

2、行深入研究。本論文的研究圍繞上述兩個(gè)問(wèn)題展開(kāi)，具體內(nèi)容如下:
　　首先是阿昔洛韋中基因毒性物質(zhì)對(duì)甲苯磺酸的檢測(cè):論文通過(guò)先固相萃取富集，后HPLC檢測(cè)的方法，測(cè)定阿昔洛韋中對(duì)甲苯磺酸的殘留。通過(guò)對(duì)固相萃取柱類型、樣品上樣速率、洗脫液濃度和洗脫速率等萃取分離參數(shù)的選擇，建立阿昔洛韋中對(duì)甲苯磺酸的固相萃取方法為:0.1g阿昔洛韋溶于10mL濃度為10-4 M鹽酸，在Cleanert SAX固相萃取柱上，阿昔洛韋溶液先以1.0mL/mi

3、n上樣，用10-4M的HCl淋洗萃取柱至完全除去阿昔洛韋，最后用10mL濃度為1.0M鹽酸洗脫，收集濾液定容到10mL，富集得到的對(duì)甲苯磺酸通過(guò)HPLC法進(jìn)行定量分析。通過(guò)對(duì)流動(dòng)相和檢測(cè)條件的選擇，建立對(duì)甲苯磺酸的色譜條件為:色譜柱:Inertsil ODS-SP C18柱(150mm×4.6mm，5μm);流動(dòng)相:乙腈∶0.1％磷酸溶液=15∶85（v/v）;柱溫:30℃;流速:1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):222nm。通過(guò)對(duì)富集-檢

4、測(cè)方法的專屬性、重復(fù)性、線性、靈敏度、準(zhǔn)確度和耐用性的考察，證明該方法具有重復(fù)性好，靈敏度高，耐用性好，操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，能有效檢測(cè)阿昔洛韋中對(duì)甲苯磺酸的殘留。
　　第二部分是阿昔洛韋2/3水合物晶型制備研究:通過(guò)對(duì)降溫結(jié)晶法、反溶劑沉淀法和反應(yīng)沉淀法進(jìn)行初步篩選后發(fā)現(xiàn):降溫結(jié)晶法和反溶劑沉淀法制得的產(chǎn)品失水率、PXRD數(shù)據(jù)與阿昔洛韋2/3水合物數(shù)據(jù)不符;而反應(yīng)沉淀法得到的產(chǎn)品用TG、FT-IR和PXRD表征，發(fā)現(xiàn)其晶型屬于阿昔洛韋

5、2/3水合物。在反應(yīng)沉淀法中，阿昔洛韋溶于氫氧化鈉溶液形成阿昔洛韋鈉鹽，用鹽酸中和后，沉淀結(jié)晶得到阿昔洛韋2/3水合物。通過(guò)對(duì)制備參數(shù)如:氫氧化鈉濃度、鹽酸濃度、鹽酸滴加速率、結(jié)晶溫度和攪拌速率等選擇，確定反應(yīng)沉淀法的制備參數(shù)如下:將阿昔洛韋溶于1.25M的氫氧化鈉溶液中，以2mL/min的滴加速率滴加1.0M鹽酸中和等量的氫氧化鈉，控制溶液溫度為10℃，攪拌速率為300rpm，待鹽酸滴加完畢，停止攪拌，靜置3h，將析出的阿昔洛韋晶體經(jīng)

6、減壓抽濾，在50℃下干燥20h，得到阿昔洛韋2/3水合物。制備得到的阿昔洛韋產(chǎn)品采用TG、FT-IR和PXRD進(jìn)行晶型表征屬于阿昔洛韋2/3水合物。該制備方法收率為93％，且制備方法便于生產(chǎn)放大。將阿昔洛韋2/3水合物在40±2℃加速試驗(yàn)下，保存6個(gè)月，其PXRD和HPLC穩(wěn)定性數(shù)據(jù)表明其具有很好的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)最后，嘗試用阿昔洛韋粗品制備阿昔洛韋2/3水合物，制得產(chǎn)品的TG和PXRD數(shù)據(jù)和阿昔洛韋2/3水合物的一致，但仍有雜質(zhì)未降到合格