濁點(diǎn)萃取—高效液相色譜法檢測牛奶中的雙酚A和壬基酚.pdf

1、牛奶的營養(yǎng)價值非常高，不但可以滿足老年人和兒童的營養(yǎng)需求并且能夠增強(qiáng)人們的體質(zhì)?，F(xiàn)在我國奶牛業(yè)的快速的發(fā)展，居民消費(fèi)水平的不斷的提高，人們對牛奶的消費(fèi)量也隨之大幅提高，與此同時人們對牛奶的安全性也提出了更高的要求。大量實(shí)驗證明從礦泉水瓶、醫(yī)療器械到食品包裝的內(nèi)里，大多都含有雙酚A(bisphenolA，BPA)和壬基酚(nonylphenol，NP)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為雙酚A和壬基酚達(dá)到一定劑量能夠威脅人體的健康。據(jù)研究表明，烷基酚中的雙

2、酚A、壬基酚等化學(xué)物質(zhì)均顯示出了不同雌激素的活性。烷基酚聚氧乙烯醚是一種非常重要的非離子型表面活性劑，它廣泛的應(yīng)用于洗滌劑和家用或工業(yè)的塑料產(chǎn)品中，烷基酚是它最終的降解產(chǎn)物。4-NP和BPA本身可以作為化工原料，也可以廣泛的應(yīng)用于多聚碳酸酯和環(huán)氧樹脂的生產(chǎn)中，在塑料的生產(chǎn)中也可以用作抗氧化劑，因此牛奶的包裝袋中含有環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A和壬基酚威脅著乳品安全。
　　本文介紹了濁點(diǎn)萃取技術(shù)的原理以及其發(fā)展，并對牛奶中雙酚A和壬基酚的

3、富集、提取和高效液相色譜的檢測條件進(jìn)行了探索與研究，建立了濁點(diǎn)萃取-高效液相色譜法檢測牛奶中雙酚A和壬基酚的理想方法。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)建立了濁點(diǎn)萃取技術(shù)對牛奶中的雙酚A和壬基酚目標(biāo)物進(jìn)行富集分離，實(shí)驗過程中優(yōu)化了破乳條件以及濁點(diǎn)萃取的條件。實(shí)驗確定了冰乙酸的用量為0.20mL，無水硫酸鈉的用量為0.90g，離心條件為5℃、10000rpm條件下離心10 min的最優(yōu)破乳因素，此時清液最清;確定了以100g/LTwee

4、n20水溶液為萃取表面活性劑，正丁醇的添加量為0.20mL、無水硫酸鈉的添加量為0.20 g，平衡溫度為60℃，平衡時間為30min的濁點(diǎn)萃取條件。
　　(2)建立了高效液相色譜-紫外檢測器法分析雙酚A和壬基酚，實(shí)驗優(yōu)化了流動相條件和色譜條件。在已選定的色譜條件下，流動相為乙腈(A)和水(B)的混合溶液，經(jīng)Inertsil ODS-3(150 mm×4.6 mm，5μm)色譜柱，于200nm下按照梯度洗脫程序?qū)﹄p酚A和壬基酚混合標(biāo)

5、準(zhǔn)溶液進(jìn)行色譜分析。洗脫程序為:(A)為45％保持8min，之后升至65％，保持27min。流速為:1mL/min，柱溫為:30℃。在優(yōu)化的此條件下雙酚A和壬基酚能夠較好的分離，峰型對稱，且避開了牛奶中雜質(zhì)和表面活性劑的干擾;實(shí)驗結(jié)果表明:在三個添加水平上（0.05、0.10、0.20μg/mL）雙酚A的添加回收率在85.60～91.20％之間，在三個添加水平上（0.10、0.20、0.50μg/mL）壬基酚的添加回收率在71.30～7

6、3.30％之間，標(biāo)準(zhǔn)偏差3.42～9.85％，實(shí)驗結(jié)果較準(zhǔn)確，精密度較高，符合環(huán)境藥物殘留檢測的要求。雙酚A在0.05～2.00μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，壬基酚在0.10～10.00μg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)都大于0.999; LOD值為2.23μg/kg～9.79μg/kg，均低于限量要求。
　　(3)本實(shí)驗建立了濁點(diǎn)萃取-高效液相色譜法檢測牛奶中的雙酚A和壬基酚，解決傳統(tǒng)萃取方法存在的問題，研究并建立安全、經(jīng)濟(jì)、高