900MHz微波輻射對(duì)雄性大鼠血漿激素水平和睪丸組織的時(shí)間毒性.pdf

1、目的：以具有晝夜節(jié)律的大鼠為生物模型，研究不同時(shí)點(diǎn)900MHz微波輻射對(duì)大鼠生殖系統(tǒng)的影響，包括：（1）不同時(shí)點(diǎn)900MHz微波輻射對(duì)血漿激素水平晝夜節(jié)律變化的影響；（2）不同時(shí)點(diǎn)900MHz微波輻射對(duì)睪丸組織活性氧水平、抗氧化酶活性和組織形態(tài)的影響。通過(guò)分析不同時(shí)點(diǎn)微波輻射對(duì)血漿激素晝夜節(jié)律及睪丸組織形態(tài)和功能的不同影響，研究機(jī)體對(duì)微波輻射的敏感時(shí)間窗，初步探討其可能的機(jī)理，為進(jìn)一步了解移動(dòng)通訊微波輻射的生物效應(yīng)和健康影響提供實(shí)驗(yàn)資料

2、。
　　方法：（1）動(dòng)物的篩選和分組：清潔級(jí)SD雄性大鼠，在光暗周期為12h:12h的光制（光照時(shí)間為9AM到9PM）下飼養(yǎng)30d培養(yǎng)晝夜節(jié)律，光照強(qiáng)度為250~350Lux，隨后利用自發(fā)活動(dòng)視頻分析系統(tǒng)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行24h自發(fā)活動(dòng)觀測(cè)，以平均速度為觀測(cè)指標(biāo)。數(shù)據(jù)經(jīng)余弦分析軟件獲取節(jié)律性參數(shù)并擬合為相位響應(yīng)曲線（phase response curves, PRCs)，對(duì)振幅作F檢驗(yàn)，確定是否存在晝夜節(jié)律性。再將有自發(fā)活動(dòng)晝夜節(jié)律的大

3、鼠每隔4h采血一次，共6次。ELISA法測(cè)血漿褪黑素水平，利用單余弦分析軟件對(duì)褪黑素水平進(jìn)行余弦擬合，篩選血漿褪黑素水平具有明顯晝夜節(jié)律的大鼠，按完全隨機(jī)設(shè)計(jì)將動(dòng)物分為對(duì)照組和輻照組2個(gè)大組，每個(gè)大組又分為2:00AM、6:00AM、10:00AM、2:00PM、6:00PM和10:00PM共6個(gè)時(shí)點(diǎn)組。
　　（2）微波輻照：輻照各組在相應(yīng)時(shí)點(diǎn)（2:00AM、6:00AM、10:00AM、2:00PM、6:00PM和10:00PM

4、）接受2000μw/cm2900MHz微波輻射，1h/d，連續(xù)30d。對(duì)照組各組在相應(yīng)時(shí)點(diǎn)（2:00AM、6:00AM、10:00AM、2:00PM、6:00PM和10:00PM）放入GTEM室，但不接受輻射，1h/d，連續(xù)30d，即為假暴露。
　?。?）節(jié)律參數(shù)獲?。狠椪涨安杉园l(fā)活動(dòng)的平均速度；輻照后每只大鼠每隔4h尾靜脈取血，ELISA法測(cè)定血漿褪黑素、睪酮和雌二醇水平；利用余弦節(jié)律軟件，根據(jù)方程式 F(t)=M+Acos(

5、ωt+Φ)將各指標(biāo)數(shù)據(jù)擬合為相位響應(yīng)曲線，得出中值（Mesor, M）、振幅（Amplitude, A）以及峰相位時(shí)相（period,Φ）三個(gè)余弦參數(shù)，分析余弦參數(shù)的變化。
　?。?）酶活性檢測(cè)和組織形態(tài)觀察：輻照后每只大鼠取一側(cè)睪丸均漿，利用試劑盒檢測(cè)ROS水平和SOD、CAT、GSH-Px酶活性；收集另一側(cè)睪丸組織，切片，進(jìn)行病理觀察。
　　結(jié)果：1.血漿激素水平晝夜節(jié)律性變化：（1）對(duì)照組、輻照組血漿褪黑素和睪酮水平在

6、微波輻照前后均顯示出明顯的晝夜節(jié)律（節(jié)律參數(shù)振幅A經(jīng)F檢驗(yàn)， P<0.05）。（2）與對(duì)照組相比，不同時(shí)點(diǎn)輻照組血漿褪黑素和睪酮水平晝夜節(jié)律發(fā)生了改變，但各輻照組依然具有晝夜節(jié)律（A作F檢驗(yàn)均有P<0.05）。（3）與對(duì)照組相比，2:00AM微波輻照組褪黑素水平晝夜節(jié)律峰值時(shí)點(diǎn)延遲9.37h，與其它5個(gè)暴露時(shí)點(diǎn)相比，其峰值時(shí)點(diǎn)變化最大；2:00PM微波輻照組褪黑素水平晝夜節(jié)律峰值時(shí)點(diǎn)延遲0.93h，與其它5個(gè)暴露時(shí)點(diǎn)相比，變化最小。（4

7、）與對(duì)照組相比，6:00PM輻照組睪酮水平晝夜節(jié)律峰值時(shí)點(diǎn)延遲11.98h，與其它5個(gè)暴露時(shí)點(diǎn)相比，變化最大；10:00AM微波輻照組睪酮水平晝夜節(jié)律峰值時(shí)點(diǎn)延遲3.01h，與其它5個(gè)暴露時(shí)點(diǎn)相比，變化最小。
　　2.微波輻照對(duì)睪丸組織酶活力和組織形態(tài)的影響:（1）與對(duì)照組相比，2:00PM微波輻射后ROS水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，10:00AM、6:00PM和10:00PM微波輻照后ROS水平升高（P<0.01）；（2）與對(duì)照組相比

8、，各時(shí)點(diǎn)輻照后SOD活性均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。（3）與對(duì)照組相比，各時(shí)點(diǎn)輻照后 CAT活性均降低，且在6:00AM、10:00 AM、6:00 PM和10:00 PM降低較為明顯（P<0.001）。（4）不同時(shí)點(diǎn)微波輻射引起睪丸組織結(jié)構(gòu)改變不同，10:00AM組和6:00AM組改變明顯，出現(xiàn)細(xì)胞排列紊亂、部分細(xì)胞退化現(xiàn)象，2:00PM組改變最小。
　　結(jié)論：(1)2000μw/cm2900MHz微波輻射對(duì)