EGCG-精氨酸交聯(lián)涂層的制備及其生物相容性的探究.pdf

1、經(jīng)皮冠狀動脈介入治療是治療冠狀動脈粥樣硬化常采用的方法，冠心病介入治療存在支架植入后再狹窄和晚期并發(fā)癥等問題。早期的金屬裸支架(BMS)用于介入治療取得了良好結(jié)果，但是其存在再狹窄問題。藥物洗脫支架(DES)攜帶抗增生的藥物，能明顯降低再狹窄率，但是由于藥物和聚合物載體引起不適和內(nèi)皮化進(jìn)程的延遲，藥物洗脫支架存在晚期血栓問題。因此需要發(fā)展抗凝血、抑制內(nèi)膜增生、抑制炎癥反應(yīng)、加快內(nèi)皮化進(jìn)程功能的血管支架?，F(xiàn)有的研究中，一個熱點方向就是在血

2、管支架表面構(gòu)建仿生平臺。茶多酚的主要成分為表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)。EGCG具有清除自由基、抗炎癥反應(yīng)、抗氧化、抗菌等作用，這些作用都與動脈粥樣硬化進(jìn)程有關(guān)。此外值得注意的是EGCG具有抑制平滑肌細(xì)胞增殖，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷的功能，因此，含EGCG的涂層有望實現(xiàn)心血管材料所需的多功能性。
　　本論文仿照聚多巴胺涂層的結(jié)構(gòu)，構(gòu)建了三種EGCG-精氨酸交聯(lián)涂層。利用傅里葉紅外光譜(FT-IR)及X射線能譜儀(XP

3、S)對涂層表面的化學(xué)組成進(jìn)行分析，證明了316L SS表面構(gòu)建的EGCG-精氨酸交聯(lián)涂層，保留了組分中的酚羥基、醌基、氨基和羧基等多種官能團。EGCG-精氨酸交聯(lián)涂層表面相比于316L SS表面，具有更好的親水性。而且EGCG-精氨酸涂層保留了部分EGCG組分的抗氧化能力，通過DPPH實驗結(jié)果表明，在三種工藝制備的EGCG-精氨酸涂層中，EGCG/R-4/2具有最高的清除自由基能力。
　　研究了不同濃度EGCG水溶液對內(nèi)皮細(xì)胞及平

4、滑肌細(xì)胞生長增殖的影響。實驗結(jié)果表明當(dāng)EGCG濃度大于200mM時，能顯著抑制平滑肌細(xì)胞增殖，但該濃度的EGCG溶液對內(nèi)皮細(xì)胞無明顯抑制作用。進(jìn)一步體外評價了EGCG-精氨酸交聯(lián)涂層對內(nèi)皮細(xì)胞(ECs)及平滑肌細(xì)胞(SMCs)的作用，結(jié)果表明EGCG-精氨酸交聯(lián)涂層能顯著抑制平滑肌細(xì)胞的增殖，但是對于內(nèi)皮細(xì)胞無顯著抑制作用，并且EGCG/R-4/2促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移。
　　由于EGCG-精氨酸交聯(lián)涂層中含有酚羥基、醌基、氨基和羧基

5、等多種官能團，其中利用涂層中的氨基與BVLD中的羧基通過EDC活化后發(fā)生縮合反應(yīng)，共價固定BVLD。XPS分析顯示在EGCG/R-4/2-涂層表面成功的固定了BVLD抗凝分子，石英晶體微天平(QCM-D)測定得到EGCG-精氨酸涂層表面BVLD固定量為450ng/cm2。固定BVLD后的涂層EGCG/R-4/2-BVLD體外能顯著延長部分凝血活酶時間(aPTT)，并能有效抑制血小板的粘附與激活。內(nèi)皮細(xì)胞在EGCG/R-4/2-BVLD表