結(jié)合位點確定的高分子雜化體的制備及其功能研究.pdf

1、蛋白質(zhì)由于本身的低溶解性、低生物藥用率和低穩(wěn)定性限制了它的臨床醫(yī)療應(yīng)用，而將聚合物以共價鍵的方式接枝到蛋白質(zhì)上形成聚合物-蛋白質(zhì)雜化體，這種雜化體同時具備了聚合物和蛋白質(zhì)的雙重性質(zhì)，使蛋白質(zhì)具有穩(wěn)定性、良好的溶解性、生物相容性及克服了蛋白質(zhì)原有的應(yīng)用局限性，除此之外，這些雜化體還能夠發(fā)生自組裝、相行為轉(zhuǎn)變以及調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)應(yīng)用范圍。蛋白質(zhì)雜化體廣泛地應(yīng)用到蛋白質(zhì)納米技術(shù)、催化劑技術(shù)、生物工程以及藥物緩釋領(lǐng)域。
　　溫敏型聚合物在受到溫

2、度變化刺激時能夠發(fā)生相形態(tài)轉(zhuǎn)變行為。這種溫敏型聚合物接枝蛋白質(zhì)形成的雜化體會引起蛋白質(zhì)溫度響應(yīng)性，這為生物蛋白醫(yī)藥緩釋，生物蛋白溫敏開關(guān)，以及生物蛋白的分離提供了廣闊的前景。本文主要研究了典型溫敏型單體N,N-二乙基丙烯酰胺（DEAAm）的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP）以及將聚合物PDEAAm接枝牛血清白蛋白（BSA）形成雜化體的制備和應(yīng)用。本文主要由三部分組成：
　　第一章本章主要介紹了“智能”高分子的科學(xué)領(lǐng)域，首先，我們對各種

3、“智能”高分子做了響應(yīng)原理的解釋以及它的合成和應(yīng)用；接著我們對聚合物與蛋白質(zhì)形成雜化體的“Grafting-to”、“Grafting-from”和“Grafting-through”三種接枝的方法和Iniferter、NMP、ATRP和RAFT四種活性自由基形成蛋白質(zhì)雜化體的合成以及應(yīng)用做了介紹。
　　第二章以接枝牛血清白蛋白賴氨酸殘基第34位的巰基為目標(biāo)，以2,2'-二吡啶基二硫醚、巰基乙醇、2,2-雙(羥甲基)丙酸及2-溴代

4、異丁酰溴為原料合成了含有二硫吡啶官能團的鏈狀引發(fā)劑（L-DPSBr）和雙臂引發(fā)劑（T-DPSBr），再以氯化亞銅（CuCl(I)）為催化劑，以N,N,N',N'',N''-五甲基二乙烯基三胺（PMDETA)為配體對單體N,N-二乙基丙烯酰胺（DEAAm）做了原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRP），并考察了在不同的反應(yīng)加料比、配體、時間、溫度以及不同比例的甲醇/水混合溶劑下，對所得聚合物PDEAAm的產(chǎn)率，分子量及分散度的影響。采用1H-NMR和

5、gPC對所得聚合物做了表征，得出了最佳條件下所得聚合物分子量較大以及分散度較窄。
　　第三章采用“grafting to”技術(shù)將鏈狀L-PDEAAm1和雙臂狀T-PDEAAm兩種聚合物通過牛血清白蛋白賴氨酸殘基第34位的巰基反應(yīng)接枝到BSA上分別形成鏈狀和雙臂狀兩種高分子雜化體，并對這些雜化體通過基質(zhì)輔助激光解吸電離離子源（MALDI）和飛行時間質(zhì)量分析器（TOF）檢測了其分子量的變化，再利用變性電泳（SDS-PAGE）和非變性電