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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
電化學(xué)沉積法中不同的電化學(xué)參數(shù)可制備形成不同空間結(jié)構(gòu)的礦化膠原涂層。本實(shí)驗(yàn)嘗試通過(guò)觀察MC3T3-e1前成骨細(xì)胞的黏附、增殖和分化狀況,分析電化學(xué)沉積的礦化膠原涂層對(duì)前成骨細(xì)胞的影響及其機(jī)制,并探討有利于成骨的電化學(xué)參數(shù)。
方法:
在電化學(xué)沉積法中選用不同參數(shù)制備鈦表面礦化膠原涂層,以掃描電鏡觀測(cè)表面形貌。在礦化膠原涂層及HA涂層、純鈦對(duì)照組表面培養(yǎng)MC3T3-e1前成骨細(xì)胞。在培養(yǎng)24h和72h時(shí)
2、行MTS檢測(cè),分析細(xì)胞黏附和增殖情況。培養(yǎng)24h時(shí),以掃描電鏡觀察涂層表面細(xì)胞的形態(tài)和黏附情況。在培養(yǎng)一周和兩周時(shí),通過(guò)Western-Blotting法檢測(cè)成骨前體細(xì)胞ALP、COL-1的表達(dá)水平,分析比較不同涂層對(duì)細(xì)胞分化能力的促進(jìn)作用。
結(jié)果:
1、前成骨細(xì)胞在各涂層上培養(yǎng)24h、72h時(shí),其MTS值均逐漸增長(zhǎng),說(shuō)明細(xì)胞在涂層表面發(fā)生了增殖反應(yīng)。礦化膠原涂層的MTS值最高,且與純鈦組存在顯著性差異(p<0.01
3、),表明礦化膠原涂層能顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖。
2、掃描電鏡觀察顯示前成骨細(xì)胞在培養(yǎng)24h時(shí)可在各涂層表面生長(zhǎng)。在致密型礦化膠原涂層組,細(xì)胞伸展良好并伸出了偽足,固定在材料表面,生長(zhǎng)情況較其他組更優(yōu)。
3、Western-Blotting檢測(cè):成骨前體細(xì)胞在相應(yīng)基板表面培養(yǎng)一周時(shí)多孔型礦化膠原涂層和致密型礦化膠原涂層ALP、 COL-1表達(dá)程度均高于純鈦組,且結(jié)果有顯著性差異;此外,致密型涂層組ALP多于多孔型涂層組,并具
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