UPLC-MS-MS法測定嬰幼兒乳粉中左旋肉堿含量的研究.pdf

1、左旋肉堿（L-肉堿）是一種非常重要的“條件營養(yǎng)素”，對于奶粉行業(yè)，尤其是是嬰幼兒乳粉行業(yè)來說，L-肉堿主要起到營養(yǎng)保健的作用。母乳中 L-肉堿含量較高，嬰兒自身不能合成肉堿，主要靠母乳供給。但隨著社會的發(fā)展，許多母親由于工作等原因不能母乳哺喂嬰兒，往往選用市售奶粉喂養(yǎng)嬰兒。所以左旋肉堿作為營養(yǎng)添加劑添加到嬰兒乳粉中。左旋肉堿作為營養(yǎng)標簽中標示的一種營養(yǎng)成分，其含量必須經(jīng)過檢測。而嬰幼兒乳粉中的L-肉堿有游離型和結(jié)合型兩種存在形式，結(jié)合態(tài)

2、約占總?cè)鈮A含量的30％，并且其生理作用與游離態(tài)等同。因此，建立嬰幼兒乳粉中的游離肉堿及總?cè)鈮A含量的檢測方法對監(jiān)測其含量意義重大。
　　本文經(jīng)研究，建立了親水作用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定嬰幼兒乳粉中左旋肉堿含量的方法。實驗結(jié)果如下：
　?。?）建立了嬰幼兒乳粉中游離 L-肉堿含量的親水作用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）分析方法。樣品經(jīng)超純水溶解定容，其稀釋液用乙腈沉淀蛋白，經(jīng)0.22μm濾膜過濾后，采用W

3、atersAcquity UPLC BEH HILIC色譜柱（1.7μm，2.1mm×50mm），柱溫為25℃，流速為0.3 mL/min，進樣量為5μL，檢測周期6min，梯度洗脫條件進行分離后，采用保留時間和多反應離子監(jiān)測(MRM)定性、定量,同位素內(nèi)標校正。結(jié)果表明，游離 L-肉堿在3.75~90.0ng/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關系，相關系數(shù)平方值（R2）為0.9997；樣品的加標回收率在97.35%~100.07%之間，相對標

4、準偏差（RSD）在0.20%~0.57%之間；檢測限（LOD）為0.023 mg/100g，定量限（LOQ）為0.075 mg/100g。
　?。?）建立了嬰幼兒乳粉中總?cè)鈮A含量的親水作用UPLC-MS/MS分析方法。樣品用40mL超純水溶解后，加入6mL的2mol/L KOH，置于100 ℃中水解1.5小時，用超純水定容，其稀釋液用乙腈沉淀蛋白，經(jīng)0.22μm濾膜過濾后用UPLC-MS/MS進行分析，UPLC-MS/MS條件同上