十子代平方抑制α-葡萄糖苷酶及改善GK大鼠糖代謝作用實驗研究.pdf

1、目的：觀察中藥十子代平方對T2DM GK大鼠糖代謝的影響，明確總方、10味組方中藥及其主要單體成分對α－葡萄糖苷酶的作用，初步闡釋十子代平方的降血糖作用機理，為今后組分中藥研發(fā)提供實驗依據(jù)。
　　方法：1體內(nèi)實驗：SPF級雄性13周齡GK大鼠，適應性喂養(yǎng)1周后給予高脂飼料連續(xù)喂養(yǎng)4周，以隨機血糖或糖負荷2小時血糖≥11.1 mmol/L[1]為成模標準，將成模GK大鼠隨機分為模型組、阿卡波糖組(13.38mg/kg)、十子代平方低

2、、中、高劑量組（分別含生藥4g/kg,8g/kg,16g/kg），每組8只；另選同齡等量健康Wistar大鼠為正常組，給予普通飼料喂養(yǎng)。第一次給藥前、給藥4周末、給藥8周末檢測GK大鼠葡萄糖耐量（OGTT），計算糖耐量曲線下面積。給藥前、給藥8周分別檢測空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（PG2H），給藥8周檢測糖化血紅蛋白(HbAlc)。2體外實驗：建立并優(yōu)化α－葡萄糖苷酶抑制劑體外篩選模型，以蔗糖為底物、阿卡波糖為陽性對照，應用不同濃

3、度十子代平方水煎劑及組方單味中藥、中藥主要單體成分水提液進行干預，觀察各藥物組對α－葡萄糖苷酶活性的影響。利用葡萄糖氧化酶法測定十子代平方、10味組方中藥及其主要單體成分對α－葡萄糖苷酶的吸光度（OD值）并計算各藥物組對α－葡萄糖苷酶的抑制率及IC50。
　　結(jié)果：1體內(nèi)實驗顯示，十子代平方能夠降低T2DM GK大鼠空腹血糖、餐后2h血糖，各劑量組與模型組相比均有統(tǒng)計學顯著性差異（P＜0.05，P＜0.01），且作用效果呈劑量依賴

4、性。十子代平方能夠降低T2DM GK大鼠HbAlc水平，各劑量組較模型組均有統(tǒng)計學顯著性差異（P＜0.05）。治療4周后，各劑量組十子代平方大鼠的OGTT曲線下面積與模型組相比未見顯著性差異（P＞0.05）；治療8周后,各劑量組十子代平方大鼠的OGTT曲線下面積與模型組相比仍無顯著性差異（P＞0.05），但其OGTT曲線下面積與治療前相比均有一定程度減小，且呈劑量依賴性。2體外實驗顯示，十子代平方、10味組方中藥及其主要單體成分對α－葡

5、萄糖苷酶均有一定抑制作用。其中，十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子和單體成分迷迭香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽對α－葡萄糖苷酶的抑制作用較強，呈明顯的濃度-效應關(guān)系。當濃度為125mg/mL時，十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子對α－葡萄糖苷酶的抑制率分別為60.20％、55.32%、50.67%、54.01%、53.13%、58.49%，同濃度阿卡波糖的抑制率為87.69%；當濃度為40mmol/L時，迷迭

6、香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽對α－葡萄糖苷酶的抑制率分別為93.52%、87.10%、78.11%，同濃度阿卡波糖(25.82mg/mL)的抑制率為90.89%。十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子、迷迭香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽和阿卡波糖抑制α－葡萄糖苷酶的 IC50分別為16.057mg/mL、44.401mg/mL、89.608mg/mL、72.146mg/mL、82.139mg/mL、21.549mg/mL、0

7、.412mg/mL、0.605mg/mL、0.806mg/mL和0.376mg/mL。
　　結(jié)論：1十子代平方能夠降低T2DM GK大鼠空腹血糖、餐后2h血糖和糖化血紅蛋白水平，加快體內(nèi)糖代謝，改善糖耐量受損狀態(tài)，減輕胰島素抵抗。2十子代平方、10味組方中藥及其10種單體成分對α－葡萄糖苷酶均有一定抑制作用。其中，十子代平方、菟絲子、茺蔚子、五味子、萊菔子、蘇子和迷迭香酸、金絲桃苷、芥子堿硫氰酸鹽能夠顯著抑制α－葡萄糖苷酶活性，具