組蛋白去乙?；敢种苿┓⒅Z他對小鼠骨髓來源樹突狀細(xì)胞表達(dá)CCL17及誘導(dǎo)CD4+CD25+T細(xì)胞增殖分化的影響.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化引起的心腦血管疾病是目前全球患病率及死亡率最高的疾病，其內(nèi)在的炎癥免疫機(jī)制仍未被揭示完全。在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的炎癥網(wǎng)絡(luò)中，樹突狀細(xì)胞在參與交通固有免疫和適應(yīng)性免疫的主要細(xì)胞成分，其表達(dá)分泌的趨化因子CCL17是其間重要的細(xì)胞因子，可活化T細(xì)胞及影響調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖分化。伏立諾他，N-羥基-N'-苯基辛二酰胺，是一類組蛋白去乙?；敢种苿籉DA批準(zhǔn)用于皮膚T細(xì)胞淋巴瘤的治療。伏立諾他在調(diào)控腫瘤細(xì)胞癌基因的同時(shí)，被發(fā)現(xiàn)其對

2、腫瘤細(xì)胞CCL17表達(dá)的抑制作用。
　　目的：
　　通過體外細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)探索伏立諾他對原代樹突狀細(xì)胞表達(dá)CCL17及其誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞向CD4+CD25+T細(xì)胞增殖分化的影響，以進(jìn)一步明確伏立諾他的抗炎機(jī)制。
　　方法：
　　ApoE-/-小鼠的骨髓細(xì)胞在體外被GM-CSF/IL-4誘導(dǎo)分化成樹突狀細(xì)胞，從小鼠脾臟分離單個(gè)細(xì)胞，CD11c+、CD4+抗體磁珠分選分別獲得CD11c+樹突狀細(xì)胞及CD4+T細(xì)胞。細(xì)胞

3、培養(yǎng)體系中伏立諾他的濃度分別為0.05uM、0.1uM、0.5uM、1.0uM，在培養(yǎng)12h/24h/36h/72h回收細(xì)胞及上清。提取總RNA后反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，熒光定量PCR測定CCL17mRNA水平，ELISA法測定細(xì)胞上清中CCL17蛋白水平，抗CD4-FITC/抗CD25-PE熒光標(biāo)記細(xì)胞后，通過流式細(xì)胞分析細(xì)胞分群情況。
　　結(jié)果：
　　1)體外培養(yǎng)體系中，樹突狀細(xì)胞CCL17表達(dá)量隨培養(yǎng)時(shí)間延長而顯著被抑制，

4、低濃度伏立諾他干預(yù)組CCL17的表達(dá)量較對照組顯著降低，其抑制水平與劑量無關(guān);
　　2)各組DC培養(yǎng)上清的CCL17水平在12h～72h內(nèi)無增長趨勢，伏立諾他干預(yù)組的平均蛋白水平顯著低于對照組;3）CD4+T細(xì)胞在體外被TGF-β/IL-2誘導(dǎo)成CD4+CD25+T細(xì)胞，DC共培養(yǎng)進(jìn)一步提高誘導(dǎo)率，加入伏立諾他干預(yù)的共培養(yǎng)體系中細(xì)胞得率較前無明顯差異。
　　結(jié)論：
　　原代樹突狀細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中，CCL17表達(dá)水平進(jìn)