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1、絲素蛋白可塑性強(qiáng),結(jié)構(gòu)可控,具備良好的生物相容性,可制備成各種生物材料,例如凝膠、支架、膜和微球等。其中絲素微球作為藥物控釋的載體和礦化模板,在藥物控釋、光學(xué)材料以及可再生的硬組織替代生物材料領(lǐng)域應(yīng)用前景廣闊。本文通過(guò)控制絲素蛋白在溶液中的微納米結(jié)構(gòu),將溶液放在特制帶電極的容器中,在低壓電場(chǎng)作用下獲得由納米/微米球組成的絲素電凝膠。冷凍干燥后,獲得絲素微球,對(duì)絲素微球的結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行表征,為絲素微球的制備提供了一種新的方法,可應(yīng)用于藥物
2、控釋載體及生物礦化模板。
首先,通過(guò)熱處理,緩慢濃縮等手段預(yù)處理絲素蛋白溶液,然后配制成1wt%-8wt%的絲素溶液,采用低壓電場(chǎng)處理絲素蛋白溶液,通過(guò)工藝變化來(lái)研究微球形成的機(jī)制。用掃描電鏡和原子力顯微鏡觀察新鮮溶液和預(yù)處理過(guò)的絲素蛋白溶液的納米結(jié)構(gòu),結(jié)果表明,溶液中絲素蛋白的納米結(jié)構(gòu)對(duì)絲素微球的形成具有關(guān)鍵性調(diào)控作用。
在電場(chǎng)調(diào)控制備絲素蛋白微球的基礎(chǔ)上,通過(guò)調(diào)節(jié)熱處理溫度和熱處理時(shí)間來(lái)改變絲素溶液的納米
3、結(jié)構(gòu),然后使用25 V的低壓電場(chǎng)處理絲素蛋白溶液,初步實(shí)現(xiàn)了絲素蛋白微球在200納米到3微米之間的尺寸調(diào)控,獲得絲素微球是α-螺旋中間態(tài)的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。
其次,以異硫氰酸熒光素標(biāo)記的牛血清蛋白(FITC-BSA)作為模型藥物,將不同質(zhì)量的牛血清蛋白與絲素溶液混合后,在電場(chǎng)作用下,使絲素蛋白在正極自組裝形成微球的同時(shí),使帶有負(fù)電荷的模型藥物在正極富集,并被包覆進(jìn)絲素蛋白微球中,結(jié)果表明:在1.33μg/mL的藥物添加濃度時(shí)初始載
4、藥率可達(dá)到81.7%,藥物能在120小時(shí)內(nèi)緩慢均衡釋放??紤]到溫和的制備條件(低壓電場(chǎng)、室溫或者低溫、水環(huán)境)、絲素蛋白的可降解性以及同藥物的良好相容性,電場(chǎng)調(diào)控制備絲素蛋白微球體系有望成為緩釋帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)和基因藥物的優(yōu)良載體。
進(jìn)一步,以絲素微球作為模板,在液態(tài)環(huán)境下模擬碳酸鈣的礦化,研究絲素蛋白作為模板誘導(dǎo)礦化的機(jī)理。結(jié)果表明:絲素微球作為模板誘導(dǎo)礦化,可以調(diào)控碳酸鈣的晶型和結(jié)構(gòu),制備出主要由穩(wěn)定的球文石組成,球文
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