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文檔簡介
1、目的:
1.建立高脂飲食誘導(dǎo)形成的肥胖大鼠模型;
2.觀察嗜酸乳桿菌、低聚果糖及其混合制劑灌胃對肥胖大鼠體重、血脂、脂聯(lián)素和血管內(nèi)皮NF-κB表達(dá)的影響,以期望為兒童心腦血管疾病危險(xiǎn)因素的早期干預(yù)提供必要的理論依據(jù)。
方法:
清潔級雄性SD大鼠40只,3周齡,55±5g,隨機(jī)分為兩組:對照組(N組)8只,予以普通飼料,高脂飲食組32只,予以高脂飼料;兩組幼鼠自由攝水,不限制飲食,每
2、周測體重一次,4周后高脂飲食組大鼠體重超過對照組平均體重20%即為造模成功的標(biāo)志;共有25只達(dá)到肥胖標(biāo)準(zhǔn),選取其中24只隨機(jī)分為三組,每組8只:單純高脂飲食組(A組),予以高脂飼料;嗜酸乳桿菌組(B組),予以高脂飼料喂養(yǎng)加嗜酸乳桿菌灌胃;聯(lián)合干預(yù)組(C組),予以高脂飼料喂養(yǎng)加嗜酸乳桿菌、低聚果糖灌胃;嗜酸乳桿菌灌胃劑量1麥?zhǔn)蠁挝?100g,低聚果糖灌胃劑量400mg/100g,單純高脂飲食組、對照組以生理鹽水灌胃,劑量為1ml/100g
3、,每周測體重一次,根據(jù)體重變化調(diào)整下周灌胃劑量;灌胃4周(即實(shí)驗(yàn)開始8周)后各組大鼠左心穿刺取血,測定血清總膽固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清低密度脂蛋白(LDL)、血清高密度脂蛋白(LDL);用雙層抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定各組大鼠血清脂聯(lián)素含量;采血后,用多聚甲醛對大鼠進(jìn)行全身灌注后,應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)測定胸腹主動脈血管內(nèi)皮NF-κB在血管內(nèi)皮的表達(dá)。采用SPSS17.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
結(jié)果:
4、> 1.高脂飲食喂養(yǎng)后各組大鼠出現(xiàn)體重增長速度加快、活動量減少、攝食及飲水量增加;實(shí)驗(yàn)第8周,各組大鼠平均體重單純高脂飲食組471.0±9.0g,嗜酸乳桿菌組450.4±4.5g,聯(lián)合干預(yù)組402.2±8.38g,對照組385.2±5.0g,結(jié)果示單純高脂飲食組高于其他各組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);嗜酸乳桿菌組高于聯(lián)合干預(yù)組和對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);聯(lián)合干預(yù)組雖高于對照組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.0
5、5)。
2.血脂水平:單純高脂飲食組(A組)、嗜酸乳桿菌組(B組)、聯(lián)合干預(yù)組(C組)、對照組(N組)血清TC分別為69.2±12.8ummol/L、52.4±3.6ummol/L、43.8±3.1ummol/L、43.2±4.8ummol/L;血清TG分別為44.6±5.8ummol/L、25.0±5.5ummol/L、23.2±3.1ummol/L、16.6±4.6ummol/L;血清LDL分別為34.8±6.6umm
6、ol/L、26.4±3.8ummol/L、20.6±3.6ummol/L、15.8±4.5ummol/L;血清HDL分別為11.6±2.2ummol/L、13.0±3.2ummol/L、12.4±2.1ummol/L、16.6±4.1umol/L。單純高脂飲食組(A組)TC、TG、LDL明顯高于對照組(P<0.05);嗜酸乳桿菌組(B組)結(jié)果示TC、TG、LDL較單純高脂飲食組明顯降低(P<0.05);聯(lián)合干預(yù)組(C組)與單純高脂飲食組
7、(A組)相比TC、TG、LDL較單純高脂飲食組(A組)降低(P<0.05);聯(lián)合干預(yù)組(C組)與嗜酸乳桿菌組(B組)相比TC、LDL明顯降低(P<0.05),TG雖有降低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;雖對照組HDL高于其他各組,但各組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);聯(lián)合干預(yù)組(C組)與對照組(N組)相比TC、TG、LDL、HDL均較高,但僅TG差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.血清脂聯(lián)素水平:對照組(N組)血清脂聯(lián)素水平1.0±0.12n
8、g/ml,單純高脂飲食組(A組)0.60±0.08ng/ml,嗜酸乳桿菌組(B組)0.78±0.07ng/ml,聯(lián)合干預(yù)組(C組)0.91±0.06ng/ml,結(jié)果顯示聯(lián)合干預(yù)組(C組)血清脂聯(lián)素水平雖低于對照組(N組),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。高脂飲食組(A組)低于嗜酸乳桿菌組(B組)、聯(lián)合干預(yù)組(C組)及對照組(N組),嗜酸乳桿菌組(B組)低于聯(lián)合干預(yù)組(C組)、對照組(N組)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
9、 4.血清脂聯(lián)素與血脂相關(guān)性的分析:脂聯(lián)素與甘油三酯呈負(fù)相關(guān)(r=-0.32),與低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇無相關(guān)性。
5.各組大鼠血管內(nèi)皮NF-κB的表達(dá):免疫組化顯示NF-κB陽性染色主要在血管內(nèi)皮細(xì)胞、中膜平滑肌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)以及部分細(xì)胞核,染色可出現(xiàn)淺黃色、棕黃色、棕褐色。單純高脂飲食組(A組)大鼠血管NF-κB陽性表達(dá)率為92.5%(37/40),細(xì)胞陽性表達(dá)得分為3.24±0.28:對
10、照組(N組)血管NF-κB陽性表達(dá)率為32.5%(13/40),細(xì)胞陽性表達(dá)得分0.49±0.17;嗜酸乳桿菌組(B組)大鼠血管NF-κB陽性表達(dá)率為67.5%(27/40),細(xì)胞陽性表達(dá)得分為2.16±0.13:聯(lián)合干預(yù)組(C組)大鼠血管NF-κB陽性表達(dá)率為57.5%(23/40),細(xì)胞陽性表達(dá)得分為1.83±0.09。結(jié)果示:單純高脂飲食組高于嗜酸乳桿菌組、聯(lián)合干預(yù)組、對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);嗜酸乳桿菌組、聯(lián)合干
11、預(yù)組高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);嗜酸乳桿菌組雖高于聯(lián)合干預(yù)組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
1.SD大鼠經(jīng)高脂飲食喂養(yǎng)4周可建立理想的肥胖模型;
2.單純高脂喂養(yǎng)8周后可見血脂水平明顯升高,血清脂聯(lián)素水平降低,血管內(nèi)皮NF-κB陽性表達(dá)增加;
3.嗜酸乳桿菌、低聚果糖及其混合制劑可使肥胖大鼠體重增加速度減慢,血脂降低,血清脂聯(lián)素水平升高,血管內(nèi)皮NF-κB陽性表達(dá)
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