連作煙田煙草青枯病的生態(tài)控制技術(shù)及其微生態(tài)機制.pdf

1、煙草青枯病(Tobacco bacterial wilt)是由茄勞爾氏菌(Ralstonia solanacearumE.F.Smith)引起的一種嚴(yán)重危害世界煙草生產(chǎn)的毀滅性細(xì)菌病害,特別是對連作煙草的危害尤為嚴(yán)重。由于目前缺乏高抗青枯病品種以及效果顯著的藥物,對青枯病的防治主要依靠農(nóng)業(yè)防治和綜合防治等農(nóng)藝措施。
　　 本研究通過田間小區(qū)試驗,探索了作物秸稈及黑麥草等不同覆蓋模式、增施鈣肥、根域活化技術(shù)對連作煙草青枯病的防治作

2、用,同時分析這些生態(tài)措施對土壤青枯菌、土壤可培養(yǎng)細(xì)菌、真菌種類及數(shù)量的影響,并且應(yīng)用PCR-DGGE技術(shù)對土壤細(xì)菌的多樣性進行分析,為今后探索連作煙田土壤健康的修復(fù)技術(shù)及其土傳病害防治新技術(shù)奠定基礎(chǔ)。主要的研究結(jié)果如下:
　　 1.2009年的田間小區(qū)試驗結(jié)果顯示,不論是前膜后草還是前膜后秸的覆蓋模式,均能夠顯著控制連作煙田煙草青枯病的發(fā)生,前期和后期的防病效果均能夠達到50％左右,十分顯著的高于裸栽+秸稈覆蓋處理(防治效果僅有

3、14％-25％)；在增施鈣肥的試驗中,裸栽+增施鈣肥處理具有顯著的防病作用,全生育期防效在53％以上,高于其它處理,且極顯著地高于對照。而地膜覆蓋+增施鈣肥處理的防病效果最高,達74％。在根域活化措施試驗中,4月底裸栽+移栽時用保根劑處理的防病效果比較明顯。
　　 2.采用常規(guī)的分離培養(yǎng)法分別分析了2009年、2010年連作煙田土壤中的青枯菌、細(xì)菌及真菌數(shù)量。兩年的分析結(jié)果表明,地膜覆蓋+種植黑麥草、增施鈣肥以及某些根域活化措施

4、,對土壤青枯菌的繁衍有明顯的抑制作用,同時,對土壤細(xì)菌和真菌數(shù)量的富集作用明顯。
　　 3.為了分析土壤微生物的多樣性,對PCR-DGGE檢測體系進行的優(yōu)化研究表明,在進行巢氏PCR的第二輪時,細(xì)菌通用引物對BacGC-P3/P2的退火溫度最適為57℃；第二輪PCR反應(yīng)以降落PCR的效果更好。DGGE電泳的最優(yōu)變性梯度范圍為40％-80％,最優(yōu)化的電泳時間為6h。
　　 4.運用優(yōu)化的PCR-DGGE檢測體系分析了201