構(gòu)樹的品質(zhì)評價及重金屬脅迫下的種內(nèi)變異研究.pdf

1、構(gòu)樹Broussonetiapa pyrifera(L.)Vent.為?？茦?gòu)屬植物,又名構(gòu)桃樹、楮樹、谷木、谷漿樹等,在我國華北、華中、華南、西南、西北各省都有分布,尤其是南方地區(qū)極為常見,資源及其豐富。其成熟果實中藥材名為楮實子(Fructus Broussonetiae),為我國歷版藥典所收載,具有補(bǔ)腎清肝、明目、利尿的功效,本草記載具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、延年益壽之功效,具有悠久的藥用歷史。但關(guān)于楮實子的藥理活性等研究并不多,活性部位和活性

2、成分尚不明確,也未見有關(guān)于其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的系統(tǒng)研究。
　　 當(dāng)前我國由于不可再生資源的大量消耗,礦山廢棄地的大量產(chǎn)生,生態(tài)環(huán)境受重金屬污染日益加劇。我國受重金屬污染的耕地面積近2000萬hm2,約占耕地面積的1/5。構(gòu)樹生長迅速,生物量大,具有很強(qiáng)的適應(yīng)性、抗逆性,抗旱耐瘠薄,抗污染等特性,對重金屬污染具有很強(qiáng)的耐受性和一定的富集作用。長期生長在重金屬污染土壤或礦山廢棄地中,出現(xiàn)了趨勢適應(yīng)性,造成其性狀、次生代謝產(chǎn)物等方面的變異,這

3、種變異一方面可能對藥材的應(yīng)用造成影響,另一方面,重金屬富集特性又可以用于環(huán)境修復(fù)。
　　 因此,為了更好地開發(fā)和利用構(gòu)樹資源,對其質(zhì)量進(jìn)行評價,并建立相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),以及其在重金屬脅迫環(huán)境中產(chǎn)生的種內(nèi)變異,我們對其進(jìn)行了初步的研究。本研究內(nèi)容主要分成三部分:
　　 第一部分:楮實子及構(gòu)樹葉的化學(xué)評價
　　 一、用紫外-可見分光光度法測定了不同產(chǎn)地及同一產(chǎn)地不同采收時期楮實子中總黃酮的含量,結(jié)果表明,不同產(chǎn)地楮實子

4、品質(zhì)差異較大,采自江蘇南京湯山的構(gòu)樹總黃酮含量為3.93％,最低者為湖南長沙,總黃酮含量為1.56％,兩者相差2倍多。且8月中旬到9月末總黃酮含量最高,為楮實子的最佳采收時期。
　　 二、對楮實子脂肪油含量進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,不同產(chǎn)地楮實子脂肪油含量相差較大,且性狀上也存在一定的差異。
　　 三、以總黃酮含量為指標(biāo)對不同產(chǎn)地構(gòu)樹葉進(jìn)行了品質(zhì)評價,顯示其差異較大。其中江蘇南京湯山產(chǎn)構(gòu)葉總黃酮含量最高,達(dá)7.19％;湖北宜

5、昌產(chǎn)構(gòu)葉總黃酮含量最低,僅為1.16％,兩者相差6倍多。且同一產(chǎn)地的雄構(gòu)葉總黃酮含量普遍高于雌構(gòu)葉。此外對不同產(chǎn)地構(gòu)樹葉的水溶性和醇溶性浸出物進(jìn)行了測定,結(jié)果顯示具有較大差異。
　　 第二部分:楮實子的生物活性評價
　　 一、以對DPPH、超氧陰離子、羥基自由基的清除能力為模型,對楮實子各極性部位的抗氧化能力進(jìn)行評價。結(jié)果表明,乙酸乙酯部位具有較強(qiáng)的抗氧化能力,當(dāng)濃度為5mg/ml時,對DPPH自由基的清除率達(dá)95.89

6、％。
　　 二、以二甲苯致小鼠耳腫脹模型和NO炎癥模型,對楮實子總提物和各極性部位進(jìn)行抗炎活性篩選,篩選出乙酸乙酯部位為楮實子的活性部位。
　　 三、對楮實子總提物和各極性部位進(jìn)行體外抗腫瘤活性測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯部位有一定的抗人乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-435)的活性。
　　 第三部分:重金屬脅迫下構(gòu)樹的種內(nèi)變異研究
　　 一、采用電感耦合等離子質(zhì)譜法測定了谷里銅礦區(qū)、棲霞鉛鋅礦區(qū)、九江城門山銅礦區(qū)及

7、大塘村土壤、構(gòu)樹葉、果實中銅、鉛、鋅3種重金屬含量,結(jié)果顯示,3個礦區(qū)土壤已受到重金屬污染;且構(gòu)樹葉和果實中重金屬含量均超標(biāo),給其應(yīng)用帶來嚴(yán)重的安全性問題。同時也說明構(gòu)樹對重金屬污染具有一定的耐受作用。
　　 二、用掃描電鏡對構(gòu)樹葉和果實表面微形態(tài)進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn),構(gòu)樹葉表皮非腺毛特性及密度產(chǎn)生了一定的變異。
　　 三、采用GS-MS對谷里銅礦區(qū)、棲霞鉛鋅礦區(qū)及上海佘山構(gòu)葉及楮實子脂溶性成分進(jìn)行比較分析,其中棕櫚酸、硬脂酸、

8、8,11-十八碳二烯酸、亞油酸4種成分為3產(chǎn)地構(gòu)葉和楮實子中共有成分,但含量差異較大。此外還在礦區(qū)構(gòu)葉及楮實子中還鑒定出一些特有成分,其中2,4-二叔丁基苯酚和3,7,11,15-四甲基-2-十六碳烯-1-醇為非脂肪酸類成分。
　　 四、對谷里銅礦區(qū)、棲霞鉛鋅礦區(qū)、谷里對照及上海構(gòu)樹各部位中內(nèi)生真菌進(jìn)行分離和鑒定,從上海西佘山、國和路虬江邊和谷里對照構(gòu)樹中分離得到內(nèi)生真菌屬于9目15科19屬36種;南京谷里銅礦區(qū)構(gòu)樹中分離得到內(nèi)