海狗油ω-3多不飽和脂肪酸對小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的預(yù)防作用.pdf

1、目的：近年來，隨著生活方式和飲食結(jié)構(gòu)的改變，非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)發(fā)病率逐漸上升，且越來越受到人們的重視。其發(fā)病機制的研究在不斷深入，但目前仍缺乏公認的特效治療藥物。本研究旨在探查ω-3多不飽和脂肪酸對小鼠非酒精性脂肪肝預(yù)防的作用途徑，為ω-3多不飽和脂肪酸在臨床治療非酒精性脂肪肝提供理論依據(jù)。
　　 方法：雄性C57BL/6J小鼠40只，于實驗環(huán)境中飼

2、養(yǎng)72小時后，隨機分為4組，高劑量組、低劑量組、模型組及正常對照組，每組10只，共飼養(yǎng)5周。本研究造摸采用Liber-Decarli含全營養(yǎng)素的高脂液體飼料：（脂肪71％，蛋白質(zhì)18%，糖類11%）。模型組喂高脂飼料（置于飲水瓶中自由進食），高劑量組喂高脂飼料（方法同模型組），海狗油0.3ml每日灌胃，低劑量組（方法同模型組）喂高脂飼料，海狗油0.15ml每日灌胃，正常對照組喂普通飼料。造模第5周末處死小鼠，取血清和肝臟組織標本。用生化

3、分析試劑盒檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性，以及血脂、膽固醇、血糖水平。蘇木素-伊紅(HE)染色觀察肝臟病理改變，免疫組織化學染色法測定CYP2E1、PPAR-α的表達(SP法)。各組間實驗數(shù)據(jù)的比較采用單因素方差分析；等級資料采用秩和檢驗。
　　 結(jié)果：
　　 1．病理學觀察：①脂肪變性程度：正常組肝細胞無脂肪變性；模型組肝細胞普遍發(fā)生脂肪變性，內(nèi)含較大的脂肪滴，其肝組織脂肪變性程度

4、與正常組相比有顯著差異(P＜0.05)；高劑量治療組與低劑量治療組肝細胞脂滴數(shù)量均明顯減少，其肝組織脂肪變性程度均明顯輕于模型組（P＜0.05）。②炎癥程度：正常組肝組織基本無炎癥細胞浸潤；模型組肝小葉內(nèi)出現(xiàn)匯管區(qū)炎癥，炎癥活動度計分明顯高于正常組(P＜0.05)；高劑量治療組與低劑量治療組炎癥活動度計分均明顯輕于模型組(P＜0.05)。
　　 2．對血清轉(zhuǎn)氨酶的影響：血清ALT和AST(IU/L):模型組ALT、AST分別為2

5、9.15±4.02、80.71±5.57，較正常組(9±3.8、51.77±16.59)顯著升高(P均＜0.01)，高劑量組ALT、AST分別為10.2±4.45、47.5±7.55，低劑量組ALT、AST分別為20.2±1.34、65.17±6.55均較模型組顯著下降（P均＜0.05），高劑量組ALT、AST明顯低于低劑量組(P均＜0.05)。
　　 3．對血清脂質(zhì)、肝臟脂質(zhì)和血糖的影響：(1)血清TG和TC(mmol/1):

6、模型組TG、TC分別為1.38±0.40、4.79±0.71，較正常組（0.55±0.12、2.34±0.44）顯著升高（P均＜0.01），高劑量組TG、TC分別為0.5±0.12、2.75±0.47，低劑量組TG、TC分別為0.85±0.81、3.30±0.41，均較模型組顯著下降（P均＜0.05），高劑量組TG、TC與低劑量組相比顯著下降(P均＜0.05)。(2)肝臟TG和TC(mmol/1)：模型組TG、TC分別為260.19±9

7、0.78、123.7±32.15，較正常組(70.63±19.67、54.27±33.55)顯著升高(P均＜0.01)，高劑量組TG、TC分別為103.58±33.28、52.17±20.24，低劑量組TG、TC分別為182.88±65.65、79±19.84，高劑量組與低劑量組TG、TC較模型組均明顯降低（P均＜0.05），高劑量組TG、TC明顯低于低劑量組(P均＜0.05)。(3)GLU(mmol/1):模型組GLU為11.74±1

8、.43，高劑量組、低劑量組GLU分別為10.55±2.22、11.6±2.91，三者與正常組8.1±1.19相比均顯著升高（P均＜0.01），但三組間相比均無顯著差異(P均＞0.05)。
　　 4．對細胞因子的影響：(1)肝臟脂聯(lián)素(mmol/1):模型組為7.27±3.45，較正常組(21.68±2.3)顯著下降(P＜0.01)，高劑量組、低劑量組分別為12.14±0.83、9.33±0.45，較模型組均明顯升高（P均＜0.0

9、5）。高劑量組較低劑量組明顯升高(P＜0.05)。(2)CYP2E1和PPAR-α:免疫組化示模型組CYP2E1表達增高，治療組表達明顯減少（P均＜0.05）；模型組PPAR-α表達明顯減少，治療組明顯增高(P均＜0.05)；兩治療組之間相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1．海狗油可減輕肝臟脂肪變性及脂肪性肝炎，是有效的NAFLD治療藥物。
　　 2．海狗油可能通過對脂聯(lián)素、CYP2E1