2型糖尿病腎病中醫(yī)證候與外周血中Ang-1、Ang-2、AnnexinA2基因表達(dá)水平的研究.pdf

1、目的:探討2型糖尿病腎病中醫(yī)證候與外周血中Ang-1、Ang-2、AnnexinA2基因表達(dá)水平的研究。糖尿病腎病是糖尿病微血管并發(fā)癥之一，其發(fā)病機制的研究發(fā)現(xiàn)，多種細(xì)胞因子參與DN的發(fā)生發(fā)展，目前研究較多的Ang-1、Ang-2被認(rèn)為在DN血管生成過程中起十分重要的作用，然而對于AnnexinA2的研究很少，但是AnnexinA2是否影響糖尿病腎病的異常血管新生？如何介導(dǎo)DN發(fā)展？這些問題尙有待研究解決。鑒于此，開展AnnexinA2

2、及其血管新生相關(guān)細(xì)胞因子的調(diào)控機制的研究對于證實DN的發(fā)病機制具有非常重要的意義。
　　 方法:按照統(tǒng)一的診斷及排除標(biāo)準(zhǔn)，納入符合標(biāo)準(zhǔn)的病例，共采集108例納入研究的外周血標(biāo)本（其中包括40例2型糖尿病腎病患者、38例2型糖尿病患者、30例健康對照組），本實驗通過對提供的108份血液樣本中提取RNA并反轉(zhuǎn)成cDNA，通過相對熒光定量PCR（染料法）對Ang-1、Ang-2、AnnexinA2的基因表達(dá)情況進(jìn)行分析。按照設(shè)計的中醫(yī)

3、證候調(diào)查問卷，收集患者的一般資料，包括姓名、性別、年齡、病程、BMI、并發(fā)癥、合并癥等資料，對40例DN患者進(jìn)行中醫(yī)證候調(diào)查并進(jìn)行辨證分析，研究DN不同中醫(yī)證候中3個目的基因的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:所納入的全部病例中，在性別、年齡、BMI、病程、并發(fā)癥、伴發(fā)其它內(nèi)科疾病等一般資料經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析無明顯差別，臨床具有可比性。其中肝腎氣陰兩虛證多于脾腎陽虛證患者，同時兼夾證中血瘀證多于濕熱證，肝腎氣陰兩虛證兼夾血瘀證及濕熱證均較脾腎陽

4、虛證多;并發(fā)癥以糖尿病視網(wǎng)膜病變(95％)及壞疽(77.5％)的發(fā)生幾率高，同時合并高血壓(92.5％)、血脂異常(82.5％)、腦血管病變(65％)的幾率較高。應(yīng)用熒光定量PCR方法檢測全部納入的108例外周血中的3個目的基因（Ang-1、Ang-2、AnnexinA2）的表達(dá)情況進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果顯示3個目的基因在DN組、DM組、健康對照組中均有表達(dá)，DN組的平均表達(dá)量高于DM組及健康對照組，且經(jīng)方差分析P＜0.05，差異具有統(tǒng)計

5、學(xué)意義;3個目的基因在入選40例DN中醫(yī)證候兩主證中表達(dá)是有差別的，脾腎陽虛證組的平均表達(dá)量高于肝腎氣陰兩虛證組，且經(jīng)t檢驗，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義;3個目的基因在DN中醫(yī)證候兩兼夾證中均有表達(dá)，但經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論:1.2型糖尿病腎病中醫(yī)證型主證以肝腎氣陰兩虛、脾腎陽虛居多，兼證以血瘀證、濕熱證居多。2.3目的基因呈“S”型的擴(kuò)增曲線，Ct值落在準(zhǔn)確的定量范圍內(nèi)，結(jié)果可靠，溶解曲線出現(xiàn)溶

6、解單峰，擴(kuò)增特異性強。3.在DN組、DM組、健康對照組中均有表達(dá)，且DN組的平均表達(dá)量高于DM組及健康對照組;3個目的基因在中醫(yī)證候兩主證中均有表達(dá)，且脾腎陽虛組高于肝腎氣陰兩虛組;3個目的基因的在中醫(yī)證候兩兼證中均有表達(dá);一定程度上說明3個目的基因在2型糖尿病腎病患者的血液中存在表達(dá)，且不同DN中醫(yī)證候中表達(dá)是有差異的，隨著DN進(jìn)程的影響，3.目的基因的平均表達(dá)水平也有變化，同時基因表達(dá)水平的變化反過來對DN的發(fā)生發(fā)展，尤其是對DN異