持久性有機污染物發(fā)光及免疫分析法研究.pdf

1、隨著現代工業(yè)技術的飛速發(fā)展，釋放到自然環(huán)境中的危害環(huán)境和人類健康的化學品越來越多，人們對這些化學品的警惕性也在不斷提高。一類被稱為持久性有機污染物(POPs)的物質已成為全球關注的熱點問題，因為這類物質具有持久性、易于生物富集，同時它們對人和生物具有免疫毒性、內分泌毒性、“三致”以及其它一些毒性效應，給人們帶來越來越多的健康和環(huán)境問題。
　　 目前對POPs的分析最常用的是色譜、色譜-質譜聯用分析技術，這是因為該技術可以分析復雜

2、物質，并且能夠獲得可靠的結果;但是這些儀器分析法需要貴重的儀器，繁重的樣品前處理(純化、濃縮或者衍生化)，大量的有害有機溶劑以及大量的輔助試劑，不利于大量樣品的實時分析測定。因此，發(fā)展能夠對POPs進行快速篩查的生物分析方法具有重要意義。
　　 熒光分析及電化學發(fā)光分析法都具有很高的靈敏度，被認為是極具應用潛力的新型分析技術。熒光分析法由于其靈敏度高使其成為目前公認的最靈敏的檢測方法之一，同時它還具有選擇性強，使用簡便等優(yōu)良特點

3、，使得熒光分析法在環(huán)境監(jiān)測及生命科學等領域獲得了廣泛的應用。免疫分析法具備有效的靈敏度、特異性、快速和低成本的優(yōu)點;可對大量的樣品進行常規(guī)分析;能夠用于樣品的定性篩選，也能夠對樣品進行定量測定以確定樣品中待測組分的含量;免疫檢測手段在臨床、生物制藥和環(huán)境化學等領域得到了廣泛的應用。電化學發(fā)光分析法不僅具有化學發(fā)光分析法的線性范圍寬、靈敏度高及儀器簡單等優(yōu)點，而且具有電化學分析過程可控性好、選擇性強、發(fā)光信號易于檢測的優(yōu)點?；谝陨犀F狀，

4、本文主要做了以下三方面的研究工作:
　　 (1)間接熒光法檢測五氯苯酚(PCP):五氯酚本身不具有熒光性質，建立五氯酚的熒光分析技術具有很大挑戰(zhàn)。Ce3+能發(fā)射強的熒光而Ce4+沒有熒光，PCP能夠消耗羥基自由基;試驗發(fā)現辣根過氧化氫酶(HRP)可以催化氧化過氧化氫(H2O2)產生羥基自由基，同時羥基自由基可以將Ce3+氧化為Ce4+，使得熒光淬滅;當存在目標物PCP時，Ce3+和PCP競爭消耗羥基自由基使得熒光淬滅受到抑制?；?/p>

5、于這個現象建立了PCP的間接熒光檢測法。該方法不需要復雜的熒光標記反應，其線性范圍為1.0×10-8～1.0×10-4M，檢測限為5.0×10-9M。
　　 (2)熒光偏振免疫分析(FPIA)檢測八氯苯乙烯(OCS):通過實驗室自制抗體，利用以羅丹明B標記的八氯苯乙烯半抗原為熒光標記物(Rhodamine B-hapten)，依據熒光標記半抗原與其抗體反應前后熒光偏振程度的不同，用競爭性方法檢測溶液中抗原(OCS)的含量。在最優(yōu)

6、條件下對OCS進行分析檢測，其線性范圍為0.65～650 nM，檢測下限為0.34 nM。該方法比高效液相色譜和氣相色譜更加簡單快速，同時回收率(＞90％)。試驗表明，該熒光偏振免疫分析法可用用于環(huán)境、生物以及農業(yè)樣品的現場分析檢測。
　　 (3)電化學發(fā)光均相免疫分析檢測三(2，3-二溴丙基)異氰脲酸酯(TBC):利用恒電壓陽極氧化法制備孔徑均一的二氧化鈦納米管陣列(TiO2 NTs)作為工作電極，以魯米諾標記的半抗原分子為發(fā)

7、光物質(luminol-hapten)，實驗室通過免疫新西蘭雄性小白兔自制多克隆抗體;luminol-hapten能發(fā)射較強的電化學發(fā)光信號，當溶液中存在抗TBC抗體時，通過發(fā)生特異免疫反應形成大分子，由于空間位阻效應抑制了電化學反應，使得電化學發(fā)光(ECL)信號淬滅，當溶液中存在目標物TBC時由于競爭結合抗體使得ECL淬滅受到抑制，基于這個原理用于檢測TBC。實驗表明，TBC濃度的對數與ECL抑制效率存在線性關系，線性范圍為0.42～