茶多酚硬脂酸酯凝膠劑的制備及質(zhì)量控制研究.pdf

1、茶多酚(Tea Polyphenols，TPs)是茶葉中兒茶素類成分的混合物，其中(-)表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯[(-) Epigallocatechin Gallate，L-EGCG]是其中最主要的功能和活性成分[1]?，F(xiàn)有研究表明TPs毒副作用極低[2]，具有抗氧化、抗癌、抗病毒、降血壓、對(duì)皮膚的保護(hù)與治療等多種藥理作用[3-4]。
　　 由于基本母核上含有多個(gè)酚羥基，TPs表現(xiàn)出脂溶性差、透皮吸收與透膜能力弱導(dǎo)致生物利用度

2、差及易被氧化導(dǎo)致產(chǎn)品不穩(wěn)定等缺點(diǎn)，這些缺點(diǎn)限制了TPs更廣泛的應(yīng)用。為了克服TPs上述缺點(diǎn)以迸一步擴(kuò)大其應(yīng)用范圍，人們?cè)诒M量保持其活性的前提下，通過(guò)化學(xué)改性研制出TPs的酯化物—脂溶性茶多酚(Lipo-soluble tea polyphenols, LTPs)，國(guó)內(nèi)外近年研究發(fā)現(xiàn)茶多酚的脂化物藥理作用廣泛[5]，毒副作用極低[6]，目前主要用作食品抗氧化劑，作為治療性藥物應(yīng)用的報(bào)道較少[7-8]。茶多酚硬脂酸酯(Teapolyphen

3、ols stearate，TPs-stearates)是目前市場(chǎng)上流通的LTPs主要產(chǎn)品之一。
　　 有文獻(xiàn)報(bào)道茶多酚的脂化物對(duì)皮膚具有保護(hù)與治療作用[9]，為了探索茶多酚硬脂酸酯外用對(duì)某些皮膚疾病的治療作用，本課題圍繞茶多酚硬脂酸酯凝膠劑的制備及其質(zhì)量控制方法進(jìn)行研究。
　　 本課題對(duì)茶多酚硬脂酸酯進(jìn)行了定性分析;通過(guò)對(duì)基質(zhì)和茶多酚硬脂酸酯溶劑的選擇，優(yōu)化了茶多酚硬脂酸酯凝膠劑的處方及制備工藝:取10.0g卡波姆均勻撒

4、于500mL煮沸并放冷的雙蒸水表面，溶脹過(guò)夜，得透明凝膠基質(zhì);精密稱量5.0g茶多酚硬脂酸酯，用80mL無(wú)水乙醇溶解，加入10.0g氮酮，充分振蕩使其溶解并轉(zhuǎn)移至基質(zhì)中，混合均勻;再向基質(zhì)中依次加入100.0g丙二醇和100.0g甘油混合均勻;最后慢加快攪地加入三乙醇胺10.0g，并加雙蒸水至1000.0g，即得0.5％茶多酚硬脂酸酯凝膠劑。
　　 通過(guò)對(duì)影響凝膠劑穩(wěn)定性的因素如離心、高濕、高溫、低溫、強(qiáng)光照射等進(jìn)行單因素考察，

5、初步確定了該制劑的儲(chǔ)存條件，為密閉低溫避光條件下保存。
　　 采用比色法對(duì)茶多酚硬脂酸酯原料藥及其制劑進(jìn)行了含量測(cè)定，并對(duì)該測(cè)定方法進(jìn)行了優(yōu)化:通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品由沒(méi)食子酸乙酯，更換成對(duì)照品茶多酚硬脂酸酯、L-EGCG-硬脂酸酯和L-EGCG-棕櫚酸酯，采用現(xiàn)配現(xiàn)用的酒石酸亞鐵溶液作為顯色劑。該三種對(duì)照品顯色后的溶液，在400nm-800nm波長(zhǎng)內(nèi)掃描，均在540nm波長(zhǎng)處有最大吸收;經(jīng)優(yōu)化后的該法，以茶多酚硬脂酸酯作為對(duì)照品，測(cè)得的

6、茶多酚硬脂酸酯含量較以沒(méi)食子酸乙酯為標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)高;以高純度茶多酚硬脂酸酯原料藥作為對(duì)照品，當(dāng)茶多酚硬脂酸酯在濃度5～250mg·(100mL)-1范圍內(nèi)，符合朗伯比爾定律，以濃度C[mg·(100mL)-1]為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為A=0.0968C+0.0091，線性關(guān)系良好(R2=0.9997)。以L-EGCG-硬脂酸酯作為對(duì)照品，在濃度5～250mg·(100mL)-1范圍內(nèi)，符合朗伯比爾定律，以濃度C

7、[mg·(100mL)-1]為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為:A=0.1221C+0.0075，線性關(guān)系良好(R2=0.9985);單位濃度的L-EGCG-硬脂酸酯顯色液的吸光度是單位濃度茶多酚硬脂酸酯顯色液吸光度的1.2614倍;經(jīng)調(diào)整后的線性回歸方程為A=0.1221C+0.0115。以L-EGCG-棕櫚酸酯作為對(duì)照品，在濃度5～250mg·(100mL)-1范圍內(nèi)，符合朗伯比爾定律，以濃度C[mg·(10

8、0mL)-1]為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為:A=0.1229C+0.0044，線性關(guān)系良好(R2=0.9983)，單位濃度的L-EGCG-棕櫚酸酯顯色液的吸光度是單位濃度茶多酚硬脂酸酯顯色液吸光度的1.2696倍，經(jīng)調(diào)整后的線性回歸方程為A=0.1229C+0.0116。
　　 本課題也研究了用紫外法對(duì)茶多酚硬脂酸酯原料藥及其制劑進(jìn)行定量分析的方法，分別以茶多酚硬脂酸酯、L-EGCG-硬脂酸酯和L-

9、EGCG-棕櫚酸酯作為對(duì)照品，以無(wú)水乙醇為溶劑，在200-500nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，均在274.80nm波長(zhǎng)處有最大吸收。以茶多酚硬脂酸酯作為對(duì)照品，在274.80nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以濃度C(μg·mL-1)作橫坐標(biāo)，吸光度(A)作縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程:A=0.0085C+0.0032，線性關(guān)系良好(R2=0.9987);以L-EGCG-硬脂酸酯作為對(duì)照品測(cè)定茶多酚硬脂酸酯含量，在濃度10～100μg·mL-1濃

10、度范圍內(nèi)，以濃度C(μg·mL-1)作橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為:A=0.0092C-0.0019，線性關(guān)系良好(R2=0.9987);單位濃度的L-EGCG-硬脂酸酯吸光度是單位濃度茶多酚硬脂酸酯吸光度的1.0824倍;經(jīng)調(diào)整后的線性回歸方程為:A=o.0092C+0.0035;以L-EGCG-棕櫚酸酯作為對(duì)照品測(cè)定茶多酚硬脂酸酯含量，在濃度10～100μg·mL-1范圍內(nèi)，以L-EGCG-棕櫚酸酯作為對(duì)