纈沙坦抑制腹膜纖維化作用機(jī)制的進(jìn)一步研究.pdf

1、目的：
　　觀察纈沙坦對腹膜纖維化大鼠腹膜結(jié)構(gòu)和超濾功能的影響，以及對大鼠腹膜組織TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7信號蛋白表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討纈沙坦對腹膜透析大鼠腹膜纖維化的抑制作用及作用機(jī)制，以協(xié)助發(fā)現(xiàn)治療腹膜纖維化作用的新靶點(diǎn)。
　　方法：
　　采用濃度為0.1%的葡萄糖氯己定1.0ml/(100g·d)腹腔注射以建立大鼠腹膜纖維化的模型。實(shí)驗(yàn)共包括三組，30只雄性SD大鼠（清潔級）隨機(jī)分為對照組、模

2、型組(腹膜纖維化組)、實(shí)驗(yàn)組（模型+纈沙坦組），每組大鼠各10只。三組大鼠均予自由進(jìn)食水，每12小時(shí)晝夜節(jié)律交替照明。適應(yīng)性喂養(yǎng)大鼠1周后開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。給予對照組大鼠生理鹽水腹腔注射1.0ml/(100g·d)；給予模型組大鼠0.1%葡萄糖氯己定腹腔注射1.0ml/(100g·d)；給予實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射0.1%葡萄糖氯己定1.0ml/(100g·d)建立大鼠腹膜透析腹膜纖維化模型的同時(shí)，將纈沙坦2.0mg/(kg·d)溶于0.5mL0

3、.9%的生理鹽水中每日予腹腔注射；注射部位均選擇大鼠右下腹部，以上操作共進(jìn)行14天。第14天后，分別測定三組大鼠的腹膜超濾量，以評估各組大鼠的腹膜超濾功能。各組大鼠的腹膜超濾量測量完畢后，處死大鼠，避開腹腔注射進(jìn)針部位留取各組大鼠的壁層及臟層腹膜組織。采取HE染色的方法觀察并對比三組大鼠壁層腹膜組織的病理學(xué)變改變，采用免疫組化檢測各組大鼠的壁層腹膜組織轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGFβ1）的表達(dá)情況，采用Western-blot檢測各組大鼠臟層

4、腹膜組織p-Smad2/3及Smad7信號蛋白的表達(dá)情況。全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS9.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用單因素方差分析。P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　通過給予大鼠0.1%葡萄糖氯己定腹腔注射，成功復(fù)制了伴有腹膜纖維化的腹膜透析大鼠模型。模型組和實(shí)驗(yàn)組大鼠較對照組大鼠腹膜超濾量降低，腹膜增厚且伴有腹膜結(jié)構(gòu)紊亂等腹膜纖維化表現(xiàn)，且腹膜組織對TGF-β1、p-S

5、mad2/3、Smad7信號蛋白的表達(dá)顯著增加。而實(shí)驗(yàn)組與模型組相比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠腹膜超濾情況較模型組大鼠明顯改善，腹膜變薄，腹膜結(jié)構(gòu)有一定程度的改善，且實(shí)驗(yàn)組大鼠腹膜對TGF-β1、p-Smad2/3蛋白的表達(dá)受抑制，作為能夠抑制腹膜TGF-β1表達(dá)的負(fù)反饋因子Smad7蛋白的表達(dá)與能夠上調(diào)TGF-β1的Smad2/3蛋白一樣受到抑制。
　　結(jié)論：
　　（1）纈沙坦能夠一定程度地改善大鼠腹膜結(jié)構(gòu)及超濾功能，抑制大鼠腹膜纖維