小鼠胸腺與異種抗原細胞的相互作用及其相關(guān)機制的研究.pdf

1、胸腺作為中樞免疫器官，是T淋巴細胞發(fā)育成熟的主要場所，在控制自身免疫耐受中具有極為重要的作用。經(jīng)典的胸腺免疫耐受理論認為，T細胞在發(fā)育過程中，如果遇到自身或外源性抗原，將形成對該抗原的中樞免疫耐受。這是因為，如果異種抗原進入胸腺一般會被抗原提呈細胞吞噬并加工提呈，在其細胞表面生成抗原肽-MHC II類分子復合體，供發(fā)育分化過程中的T細胞識別并發(fā)生凋亡。曾有文獻報道:人為將同種異體的胰島細胞或肝細胞注入到受體胸腺中一段時間后，仍可以在受體

2、胸腺中找到注射用胰島細胞或肝細胞，甚至在胸腺中發(fā)現(xiàn)有肝小葉結(jié)構(gòu)的生成。但在1997年時有人發(fā)現(xiàn)，胸腺內(nèi)注射的同種異體抗原在受體胸腺內(nèi)的存活時間有限，而當受體注射免疫抑制劑ALS或CsA時，才會延長供體抗原在受體胸腺內(nèi)的存活時間，證明胸腺內(nèi)有可能發(fā)生了一定的免疫應答反應。
　　針對上述問題所做出的不同結(jié)果，在本實驗中初步探討了將異種抗原細胞A549（人肺腺癌細胞）移植于昆明鼠胸腺內(nèi)所發(fā)生的反應，及其在此過程中與胸腺組織微環(huán)境相互作用

3、的相關(guān)機制。
　　本實驗中首先采用DiI染料標記的人肺腺癌細胞A549在小鼠胸腺內(nèi)進行微創(chuàng)注射，然后選擇不同的時間檢點對小鼠胸腺組織進行組織病理學觀察，初步研究了異種腫瘤細胞A549在小鼠胸腺內(nèi)的命運及其對胸腺微環(huán)境造成的影響;進而采用流式細胞檢測技術(shù)，分析了小鼠胸腺內(nèi)注射異種抗原細胞A549后T淋巴細胞亞群的細胞數(shù)目及比例的變化與小鼠胸腺內(nèi)的免疫狀態(tài)及免疫水平。同時選用在同等條件下小鼠脾臟內(nèi)注射等量人肺腺癌細胞的方法作為對照，對

4、比分析了異種抗原細胞A549在小鼠胸腺與脾臟內(nèi)的不同命運及可能發(fā)生的免疫機制。
　　通過以上研究，我們初步得到以下結(jié)果:
　　1.異種抗原細胞不能在胸腺中長期存在，會被胸腺中的免疫細胞殺傷并清除，但其清除腫瘤細胞的時間遠遠長于脾臟。
　　2.胸腺內(nèi)注射異種抗原細胞后，CD4+T細胞與CD8+T細胞的比例上升，CD4+/CD8+T細胞的比值下降;而脾臟內(nèi)注射異種抗原細胞后，CD4+T細胞的比例上升，CD8+T細胞比例無顯

5、著性變化，CD4+/CD8+T細胞的比值增大。
　　3.小鼠胸腺內(nèi)異種抗原細胞的注射，會使胸腺微環(huán)境遭到破壞，包括注射時造成的機械損傷，同時腫瘤細胞的存在導致小鼠胸腺皮質(zhì)區(qū)面積減小，髓質(zhì)區(qū)面積增大，纖維化上皮細胞增生及細胞外基質(zhì)增多等，但隨著腫瘤細胞的凋亡及清除，胸腺微環(huán)境逐漸修復并回歸常態(tài)。
　　4.異種抗原細胞A549的小鼠胸腺內(nèi)注射使得胸腺中T淋巴細胞各亞群的比例發(fā)生變化，其中雙陽性T淋巴細胞大量凋亡，而雙陰性及單陽性

6、細胞的比例相對升高。
　　通過以上結(jié)果，得出的結(jié)論是:
　　1.在此實驗條件下，小鼠胸腺內(nèi)與異種抗原細胞的相互作用，會使胸腺微環(huán)境受到傷害，并對胸腺細胞的發(fā)育分化產(chǎn)生一定的影響。
　　2.相同的異種抗原細胞，在分別移植于胸腺或脾臟均會誘導產(chǎn)生由淋巴細胞介導的排斥反應;但發(fā)生在胸腺的免疫效應，明顯地遲于脾臟。
　　3.研究表明:在胸腺內(nèi)成熟的淋巴細胞對異種抗原具有識別和應答能力。
　　本論文關(guān)于胸腺與異種抗原