AE-941(Neovastate)對(duì)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:
　　 潰瘍性結(jié)腸炎(UlcerativeColitis，UC)為炎癥性腸病(InflammatoryBowelDisease，IBD)的一種，病變主要浸潤(rùn)粘膜層和粘膜下層，目前觀點(diǎn)認(rèn)為基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrixmetalloproteinases，MMPs)與基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子(Tissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinases，TIMPs)的代謝失衡，導(dǎo)致了細(xì)胞外基質(zhì)的合成與

2、降解失衡，進(jìn)而導(dǎo)致了潰瘍的形成。AE-941(Neovastate)作為一種天然的MMP抑制劑，本研究將其應(yīng)用于大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型中，通過(guò)觀察大鼠的一般狀態(tài)，記錄疾病活動(dòng)指數(shù)，HE染色光鏡下觀察病理變化、結(jié)腸黏膜損傷情況，并從基因水平和蛋白水平檢測(cè)MMP-2、MMP-9表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化，探討(Neovastate)AE-941對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎可能的保護(hù)機(jī)制，為臨床UC的治療尋找新的方法。
　　 方法:
　　 采用Morri

3、s提出的TNBs-乙醇復(fù)合物灌腸造模，SD雄性大鼠54只，體重約180-220g，隨機(jī)分為3組，每組18只，正常組:僅給予鹽水灌腸，并予鹽水日一次灌胃;AE-941(Neovastate)組:給予TNBS-乙醇混合液灌腸，并予AE-94110mg/kg日一次灌胃;模型組:TNBS-乙醇混合液灌腸，并予生理鹽水日一次灌胃，觀察大鼠的一般狀態(tài)、記錄疾病活動(dòng)指數(shù)(diseaseactivityindex，DAI)，并分別于灌腸后第7、21、5

4、6天處死動(dòng)物，每組每次6只，10(×)光鏡下記錄結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)(colonicmucosadamageindex，CDMI)，HE染色光鏡下觀察病理學(xué)改變，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)方法和免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)大鼠病變結(jié)腸黏膜MMP-2、MMP-9在基因和蛋白水平的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:
　　 1、與同期正常組比較，模型組DAI及CMDI評(píng)分均顯著增高，差異呈顯著性(P＜0.05)，AE-941組DAI

5、及CMDI評(píng)分均較同期模型組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2、模型組MMP-2、MMP-9在mRNA及蛋白水平上的表達(dá)均顯著高于同期正常組(P＜0.05)，AE-941組MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白表達(dá)量均顯著低于同期模型組(P＜0.05)。
　　 3、MMP-2、MMP-9與UC病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，它們的相關(guān)系數(shù)分別為:0.835和0.917(P＜0.05，基因水平)，0.791和0.

6、881(P＜0.05，蛋白水平)。
　　 結(jié)論:
　　 1、MMP-2和MMP-9在TNBs-乙醇灌腸誘導(dǎo)的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型中表達(dá)顯著增高，MMP-2和MMP-9與UC的發(fā)病密切相關(guān)，有著重要作用。
　　 2、MMP-2和MMP-9可反映UC病情嚴(yán)重程度。
　　 3、AE-941(Neovastate)可以抑制MMP-2和MMP-9的表達(dá)，減輕結(jié)腸粘膜炎癥損傷程度，對(duì)于TNBs-乙醇誘導(dǎo)的大鼠UC具有