非酒精性脂肪肝與胰島素抵抗相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：采用高糖、高脂飲食制備大鼠非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver，NAFL)模型，檢測(cè)肝組織病理變化與血清瘦素水平、血清胰島素水平及胰島素抵抗指數(shù)的相關(guān)性，以闡明瘦素、胰島素抵抗在NAFL發(fā)病機(jī)制中的作用，為有效防治非酒精性脂肪肝提供理論依據(jù)。 方法：將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC)和實(shí)驗(yàn)組(FC)。正常對(duì)照組喂常規(guī)飼料，能量為2156 kcal/kg實(shí)驗(yàn)組喂高糖、高脂飼料主要為普通飼料63

2、％，蛋黃粉21％，豬油8％，蔗糖8％。高糖高脂飼料能量為：4146kcal/kg。其中每組分2、4、6、8、12周5個(gè)時(shí)相點(diǎn)，每時(shí)相點(diǎn)NC組3只大鼠，F(xiàn)C組5只大鼠。動(dòng)態(tài)觀察各組(1)體重變化，(2)肝臟濕重變化，(3)血測(cè)空腹血糖(FBG)、血清甘油三脂(TG)、血清膽固醇(TC)、空腹血清胰島素(FIN)、血清瘦素(LP)，(4)計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)，HOMA-IR=FBG*FINS/22.5。(5)肝組織HE染色，光鏡觀察肝臟組織病

3、理變化。(6)電鏡觀察脂肪肝肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。(7)分析TG、FC、FIN、HOMA-IR及LP與脂肪肝嚴(yán)重程度的關(guān)系。 結(jié)果: (1)喂養(yǎng)高糖、高脂飲食后，實(shí)驗(yàn)組大鼠體重增長(zhǎng)明顯大于對(duì)照組，4周后兩組之間大鼠體重增長(zhǎng)即有顯著性差異(C79.2±8.228g vs.NC52.333±5.576g，p<0.05)。6、8、12周時(shí)均高于同一時(shí)相點(diǎn)的C組，差異顯著(p<0.05)。NC組各組間無(wú)明顯差異，F(xiàn)C組各組間有顯著差異

4、(0<0.05)。 (2)FC組和NC組大鼠肝臟均有增大，2周、4周、6周、8周、12周時(shí)隨喂養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，肝濕重均增高，NC組各組間及FC組各組間有顯著差異(p<0.05)。FC組和NC組間無(wú)顯著差異(p>0.05)。 (3)兩組大鼠血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHOL)，2周后FC組較NC組增加(p>0.05)。4周、6周、8周、12周時(shí)均高于同一時(shí)相點(diǎn)的NC組，差異顯著(p<0.05)。NC組各組間無(wú)明顯差異，

5、FC組各組間有顯著差異(p<0.05)。FC組血糖較C組血糖有增加，差異不顯著(p>0.05)，F(xiàn)C組各組間及NC組各組間無(wú)明顯差異。 (4)大鼠血清瘦素2周后FC組較NC組增加(p>0.05)。4周、6周、8周、12周時(shí)均高于同一時(shí)相點(diǎn)的NC組，差異顯著(p<0.05)。NC組各組間無(wú)明顯差異，F(xiàn)C組各組間有顯著差異(p<0.05)。 (5)FC組大鼠血清胰島素2周后F組較NC組增加(p>0.05)。4周、6周、8周、

6、12周時(shí)均高于同一時(shí)相點(diǎn)的NC組，差異顯著(p<0.05)。NC組各組間無(wú)明顯差異，F(xiàn)C組各組間有顯著差異(p<0.05)。 (6)FC組大鼠胰島素抵抗指數(shù)2周后FC組較NC組增加(p>0.05)。4周、6周、8周、12周時(shí)均高于同一時(shí)相點(diǎn)的NC組，差異顯著(p<0.05)。NC組各組間無(wú)明顯差異，F(xiàn)C組各組間有顯著差異(p<0.05)。 (7)NC組大鼠肝臟無(wú)異常變化，質(zhì)柔軟、色赤褐。FC組肝臟體積明顯增大，包膜緊張，

7、邊緣圓鈍，整個(gè)肝臟顏色呈奶黃色，切面油膩，組織較脆。 (8)HE染色：NC組肝細(xì)胞排列整齊，肝小葉規(guī)則，細(xì)胞中央有大而圓的核，細(xì)胞質(zhì)均勻，肝細(xì)胞形態(tài)正常。隨著高糖高脂飲食時(shí)間的延長(zhǎng)，肝脂肪變程度加重。FC組8周即達(dá)輕度脂肪肝診斷標(biāo)準(zhǔn)。12周即達(dá)到中、重度脂肪肝診斷標(biāo)準(zhǔn)。 (9)電鏡示對(duì)照組肝細(xì)胞核規(guī)整，線粒體數(shù)量多，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)未見(jiàn)異常，成群分布于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)組線粒體輕度水腫，部分嵴消失，部分嵴排列紊亂。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有脫顆

8、粒現(xiàn)象，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有橢圓形脂滴。 結(jié)論： 1.FC組雄性Wistar大鼠高糖高脂飲食喂養(yǎng)4周后出現(xiàn)高胰島素血癥空腹盤(pán)糖不高，胰島素敏感指數(shù)降低，成功誘發(fā)出胰島素抵抗。胰島素抵抗程度越大，大鼠肝脂肪變程度越高，說(shuō)明胰島素抵抗是脂肪肝發(fā)病的危險(xiǎn)因素。 2.FC組大鼠的瘦素的濃度比NC組的高FC組內(nèi)肝臟內(nèi)脂肪沉積程度越嚴(yán)重，瘦素濃度越高，提示高瘦素血癥可能是脂肪肝的一個(gè)危險(xiǎn)因素，瘦素對(duì)脂肪在肝臟的沉積起一定作用。