VEGF、皮片延遲對帶真皮下血管網(wǎng)皮片成活率影響的實驗研究.pdf

1、目的:
　　 1.探討真皮下注射血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和外科延遲是否可以提高帶真皮下血管網(wǎng)皮片術(shù)后成活率;
　　 2.觀察術(shù)后皮片真皮下血管網(wǎng)內(nèi)徑、及橫斷面及數(shù)目的變化;3.探討內(nèi)源性生長因子VEGF對皮片中平均微血管數(shù)量的變化及腎上腺髓質(zhì)素(ADM)在皮片延遲過程中對皮下血管的形成的作用機制。
　　 方法:
　　 設(shè)計大鼠帶真皮下血管網(wǎng)皮片延遲模型，真皮下注射VEGF模型，及延遲和皮下注射疊加模型

2、，觀察術(shù)后皮片的組織學(xué)變化及皮片成活率;通過酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)(Elisa)對延遲模型皮片組織組織勻漿VEGF定量分析;統(tǒng)計學(xué)分析VEGF及腎上腺髓質(zhì)素(ADM)在皮片延遲手術(shù)后的表達情況的變化是否與真皮下血管網(wǎng)變化呈相關(guān)性。
　　 結(jié)果:
　　 1、皮片真皮下注射VEGF組，顯微鏡下觀察到在注射點周圍新生血管芽明顯增多;
　　 2、皮片延遲組真皮下血管管徑明顯增粗;
　　 3、延遲及疊加組可見大量血管芽并

3、且真皮下血管內(nèi)徑明顯增粗;
　　 4、皮片的成活率:生長因子注射組、疊加組術(shù)后皮片成活率明顯高于生理鹽水組(P＜0.05);延遲組及生長因子組無顯著差異(P＞0.05);疊加組較其它實驗組有顯著差異(P＜0.05);
　　 5、與鹽水組比較，延遲模型中VEGF的含量在皮片延遲術(shù)后3天開始增加，第7、14顯著高于基礎(chǔ)值(P＜0.05)，第14天回落至基礎(chǔ)值水平;
　　 6、經(jīng)RT-PCR檢測延遲皮片ADMmRNA的

4、含量，3天時逐漸增高，在6、9天時達峰值，隨后其表達含量逐漸下降;
　　 7、雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)檢測大鼠外周血和延遲創(chuàng)面組織中ADM的含量，并與延遲相應(yīng)時間點的皮片平均血管內(nèi)徑(MVD)做相關(guān)性分析，結(jié)果并無顯著相關(guān)性。
　　 結(jié)論:
　　 1、大鼠真皮下注射VEGF能促進局部血管內(nèi)皮生長，其生物學(xué)效應(yīng)是促進新生血管芽的形成;
　　 2、進行四周離斷處理的延遲模型可以促進皮片下血管內(nèi)徑

5、的增、相對于對照組可以明顯提高皮片的成活率;
　　 3、真皮下注射VEGF及外科延遲模型均可以有效提高帶真皮下血管網(wǎng)皮片術(shù)后成活率，但是兩者的作用機制不同;
　　 4、疊加組可以進一步提高皮片術(shù)后的成活率;
　　 5、經(jīng)酶聯(lián)免疫(Elisa)檢測延遲過程中VEGF的含量的表達在延遲處理的過程中發(fā)生變化，說明皮膚在缺氧、缺氧的環(huán)境下，內(nèi)源性VEGF對組織創(chuàng)傷修復(fù)的過程起到了重要的作用;
　　 6、皮膚組織由