TSLP在經(jīng)皮膚致敏小鼠模型中的表達.pdf

1、目的：近20年來,包括哮喘、過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎和食物過敏在內(nèi)的過敏性疾病在現(xiàn)代社會的發(fā)病率逐年升高。在一個于1991年開始的“國際兒童哮喘與過敏研究的流行病學(xué)調(diào)查”中,在世界范圍對多個國家數(shù)十萬兒童哮喘、過敏性鼻/結(jié)膜炎、特應(yīng)性皮炎的發(fā)病進行調(diào)查,發(fā)現(xiàn)近年來上述的過敏性疾病明顯增多,癥狀越來越嚴(yán)重。研究表明,過敏性疾病可能存在共同的始動因素,但目前,過敏性疾病的發(fā)病機制仍不明確。
　　 過敏性疾病在嬰幼兒,兒童中發(fā)病率逐年增

2、高的背景下,明確過敏性疾病病因,了解過敏性疾病致敏途徑有著積極的意義。在復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院4年中對臨床診斷為過敏性疾病、高度懷疑牛奶和(和)雞蛋過敏的1～36月齡嬰幼兒進行牛奶和雞蛋特異性血清IgE的水平進行回顧性分析,發(fā)現(xiàn)在小于6月齡年齡段的該類患兒中,陽性比率分別為31.5％和44.4％,實際生活中在小于6月齡的嬰幼兒中,經(jīng)食道接觸牛奶和雞蛋的幾率是很低的。
　　 經(jīng)胃腸道致敏途徑很難完全的解釋該類情況的出現(xiàn),因此考慮另外

3、的致敏途徑,因此設(shè)想是否是由于新生兒出生后,其經(jīng)過皮膚與外界復(fù)雜的環(huán)境中特定的過敏原接觸所導(dǎo)致的全身性過敏性疾病。
　　 本研究選取了新生小鼠為建模對象,通過使用OVA作為過敏原進行經(jīng)皮致敏,然后選取相對處于過敏發(fā)病中更上游的研究指標(biāo)——TSLP,在模型各類組織中的表達進行觀察,觀察過敏原在新生小鼠中經(jīng)皮致敏造模的可能性,探索相關(guān)造模技術(shù),以及了解TSLP是否能夠在造模的過程中產(chǎn)生“初始推動因素”的作用,并探討其作用機制。

4、>　　 方法
　　 1、針對新生小鼠采用OVA斑貼致敏小鼠:
　　 2、通過通過觀察外部表現(xiàn)和激發(fā)后表現(xiàn)觀察總體致敏情況;
　　 3、用Real-timePCR檢測致敏組和和對照組小鼠胸腺、肺組織、脾臟、小腸組織TSLP表達,探討TSLP在經(jīng)皮致敏過程中的作用機制。
　　 結(jié)果
　　 一.OVA致敏組小鼠組中致敏后外部表現(xiàn)
　　 致敏組小鼠與對照組小鼠斑貼部位皮膚炎癥性表現(xiàn):
　　

5、 致敏階段結(jié)束后皮膚出現(xiàn)炎癥性表現(xiàn)的比率如下:
　　 OVA致敏組20％(3/15)出現(xiàn)致敏部位明顯皮膚炎癥性表現(xiàn);NS對照組無小鼠出現(xiàn)(0/15)致敏部位皮膚炎癥性表現(xiàn)。
　　 二.激發(fā)后小鼠表現(xiàn)
　　 OVA致敏組經(jīng)不同抗原局部點刺激發(fā)(左后足背)結(jié)果:
　　 新鮮雞蛋清激發(fā)組點刺部位出現(xiàn)紅腫比率:0％(0/5),人用點刺雞蛋抗原激發(fā)組點刺部位出現(xiàn)紅腫比率:0％(0/5),生理鹽水點刺部位出現(xiàn)紅腫比

6、率:0(0/5)對照組經(jīng)不同抗原局部點刺激發(fā)(左后足背)結(jié)果:
　　 經(jīng)新鮮雞蛋清局部點刺激發(fā)(左后足背)結(jié)果:新鮮雞蛋清激發(fā)組點刺部位出現(xiàn)紅腫比率:0％(0/5),人用點刺雞蛋抗原激發(fā)組點刺部位出現(xiàn)紅腫比率:0％(0/5),生理鹽水點刺部位出現(xiàn)紅腫比率:0(0/5)。經(jīng)新鮮雞蛋清激發(fā)30分鐘后的前后對比,未見明顯紅腫等過敏性炎癥表現(xiàn)。
　　 三.致敏部位皮膚、肺、小腸病理切片比較(HE染色)
　　 1)致敏部位

7、皮膚相對對照組,致敏組的致敏部位皮膚表皮增厚,可見明顯炎癥細胞浸潤。
　　 2)肺組織病理切片結(jié)果:肺組織實驗組與對照組小鼠肺泡壁結(jié)構(gòu)完整,氣道炎癥及氣管壁增厚情況均不明顯,氣道周圍炎性細胞浸潤少,兩組對比無明顯差異。
　　 3)小腸組織病理切片:小腸組織實驗組與對照組小鼠粘膜結(jié)構(gòu)完整,炎癥細胞浸潤情況均不明顯,兩組對比無明顯差異。
　　 四.OVA致敏小鼠模型TSLPmRNA與對照組表達比較
　　 1、

8、致敏部位皮膚TSLPmRNA表達變化致敏組小鼠致敏部位皮膚TSLPmRNA表達高于對照組,但差異無顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.083)。
　　 2、致敏組小鼠肺TSLPmRNA表達高于對照組,但差異無顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.224)
　　 3、致敏組小鼠胸腺TSLPmRNA表達高于對照組,但差異無顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.277)
　　 4、致敏組小鼠脾臟組織TSLPmRNA表達達低于對照組,但差異無顯著的統(tǒng)計學(xué)

9、意義(P=0.217)
　　 5、致敏組小鼠小腸組織TSLPmRNA表達達高于對照組,但差異無顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.647)
　　 結(jié)論
　　 1、對新生小鼠經(jīng)皮致敏,能使得致敏部位皮膚出現(xiàn)類似過敏炎癥的表現(xiàn)。
　　 2、致敏小鼠的致敏部位皮膚、胸腺、肺組織、脾臟組織的TSLP表達較對照對有增高趨勢,但無顯著統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3、經(jīng)皮膚致敏可能是嬰幼兒期過敏的途徑之一,但仍需進一步研究證實。