水稻MPIC基因功能與表達(dá)的初步研究.pdf

1、基因?qū)蚩剐允侵参锏挚共≡秩镜囊粋€(gè)重要手段。水稻的抗稻瘟病基因Pi9與Pi2具有廣譜的稻瘟菌抗性。這2個(gè)基因編碼的蛋白屬于NBS-LRR家族。在前期研究工作中，我們利用域替換技術(shù)，將Pi2的NBS結(jié)構(gòu)域與Pi9的LRR結(jié)構(gòu)域相融合，構(gòu)建了鑲嵌基因Pi2/Pi9。與Pi9不同，Pi2/Pi9轉(zhuǎn)基因植株激活了水稻自體免疫抗性反應(yīng)。因此，在本研究中我們將Pi2/Pi9命名為MPIC（(m)odifier of(Pi)9，(c)onsti

2、tutively）。
　　 為了研究MPIC基因激活的水稻自體免疫反應(yīng)的分子機(jī)制，我們開(kāi)展了以下的研究?jī)?nèi)容:(1) MPIC和Pi9轉(zhuǎn)基因植株的稻瘟病菌抗譜和其它表型的差異分析;(2)比較MPIC和Pi9蛋白的亞細(xì)胞器定位異同;(3)表達(dá)分析篩選MPIC調(diào)控的下游基因;(4)部分MPIC下游應(yīng)答基因的啟動(dòng)子克隆和功能初步分析。
　　 目前，我們?nèi)〉昧艘韵轮饕獙?shí)驗(yàn)結(jié)果:(1) MPIC轉(zhuǎn)基因水稻表現(xiàn)為生長(zhǎng)發(fā)育滯后、植株矮小

3、、根部發(fā)黑、葉片卷曲并有類(lèi)病斑等自體免疫表型。(2) MPIC轉(zhuǎn)基因水稻的過(guò)氧化氫以及水楊酸(salicylic acid，SA)水平顯著提高;(3)MPIC轉(zhuǎn)基因水稻的稻瘟病菌抗譜和Pi9相同;(4) MPIC蛋白更多地集中于細(xì)胞核或細(xì)胞核區(qū)域，而Pi9蛋白則在整個(gè)細(xì)胞中都有分布。(5)篩選了13個(gè)在MPIC轉(zhuǎn)基因水稻中特異表達(dá)的基因，并克隆其中的6個(gè)基因的啟動(dòng)子，構(gòu)建了相應(yīng)的啟動(dòng)子和LUC報(bào)告基因的融合載體。上述結(jié)果為進(jìn)一步分析MP