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文檔簡介
1、目的:
用臨床治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎使用頻率高的解表藥(麻黃、桂枝)祛風(fēng)濕藥(川烏、草烏)活血藥(當(dāng)歸、川芎)及其復(fù)方制成煎劑,對佐劑性關(guān)節(jié)炎的大鼠灌胃治療,通過觀察足爪腫脹、病理改變、炎性因子等指標(biāo)的改變,探討不同配伍的中藥的作用效果、配伍規(guī)律、藥物作用機制以及在復(fù)方中發(fā)揮主要作用的藥物等。
方法:
1.健康雄性Wistar大鼠24只,隨機分為模型組和對照組,每組12只,模型組每只左后足趾部皮內(nèi)注
2、射卡介苗濃度10mg/ml的完全弗氏佐劑0.1ml,對照組相同部位注射等量的生理鹽水,制炎后每隔日測定雙側(cè)足爪腫脹程度,第22天,處死大鼠,取右側(cè)踝關(guān)節(jié)制作切片,觀察滑膜組織,以確定造模是否成功。
2.雄性Wistar大鼠84只,隨機分為對照組、模型組、地塞米松組、復(fù)方組、祛風(fēng)濕組、活血組、解表組,每組12只。除對照組之外,其余各組均制作佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠模型。各組給予不同的藥物合劑,藥物用量根據(jù)動物給藥劑量公式和大鼠體表面
3、積計算所得,每組灌胃22天。模型制各開始后每隔天測量雙側(cè)足爪腫脹度,以觀察治療后的療效;第22天,心臟采血,測量血清NO、MDA水平與SOD活性;每組隨機選擇3只取右側(cè)踝關(guān)節(jié)做切片,以觀察滑膜組織病理改變。其余9只用ELISA法檢測足爪浸液中TNF-α、IL-1β、PGE2水平。剝離每只大鼠的胸腺和脾臟,分別稱重,計算胸腺指數(shù)或脾臟指數(shù)。
結(jié)果:
1.模型組大鼠左側(cè)足爪在注射佐劑次日即明顯腫脹,第3天達高峰,
4、以后逐漸減輕。第11天右側(cè)足爪開始腫脹,第15天達高峰,關(guān)節(jié)活動功能障礙,此后腫脹逐漸減輕直至觀察結(jié)束。模型組除個別大鼠外,均可見耳部、鼻尖、尾部炎性小結(jié)。右側(cè)踝關(guān)節(jié)病理切片顯示:滑膜細胞增生,炎癥細胞浸潤,血管翳形成。說明佐劑性關(guān)節(jié)炎造模成功。
2.與模型組比較,復(fù)方組、地塞米松組、祛風(fēng)濕組、解表合劑、活血合劑對左右雙側(cè)足爪腫脹度均有明顯地抑制作用,其中復(fù)方組、地塞米松組、祛風(fēng)濕組作用最強。組間比較顯示:左側(cè)足爪從治療后
5、第7天開始,右側(cè)足爪從治療后的第13天開始,復(fù)方組、地塞米松組、祛風(fēng)濕組的治療效果基本相同。與復(fù)方組比較,活血組對足爪腫脹抑制程度弱于復(fù)方組,解表組的抑制作用最弱,且與復(fù)方組有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。
3.復(fù)方組、地塞米松組、祛風(fēng)濕組足爪浸液TNF-α、IL-1β、PGE2水平明顯低于模型組,解表組足爪PGE2水平低于模型組,活血組足爪浸液TNF-α、IL-1β、PGE2的水平與模型組無統(tǒng)計學(xué)差異。解表組、活血組足爪浸液TNF-α
6、、IL-1β、PGE2水平要明顯高于復(fù)方組。
4.復(fù)方組、地塞米松組、祛風(fēng)濕組、活血組血清MDA、NO水平明顯低于模型組,SOD活性高于模型組,而解表組與模型組無統(tǒng)計學(xué)差異。
5.造模組脾臟指數(shù)與胸腺指數(shù)明顯高于正常,而地塞米松組明顯低于正常;各中藥治療組的脾臟指數(shù)與胸腺指數(shù)均有所升高,與模型組沒有統(tǒng)計學(xué)差異。
6.各組大鼠踝關(guān)節(jié)病理切片顯示:復(fù)方組和祛風(fēng)濕組少見炎性細胞浸潤、滲出及血管翳形成,
7、解表組和活血組有滑膜細胞增厚,輕中度炎癥細胞浸潤,偶見血管翳形成。
結(jié)論:
1.本次實驗造模的AA大鼠在臨床表現(xiàn)、病理、免疫與人RA有著相似的特點,是研究RA的較理想模型。
2.復(fù)方合劑、祛風(fēng)濕合劑、活血合劑、解表合劑均能抑制AA大鼠足爪的腫脹,改善踝關(guān)節(jié)病理變化,其中,復(fù)方合劑有明顯的治療效果,祛風(fēng)濕合劑在治療效果與復(fù)方合劑無差異,說明:祛風(fēng)濕合劑在復(fù)方合劑中可能發(fā)揮主要的治療作用。
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