水稻密穗突變體的基因定位及幼穗特異表達(dá)啟動(dòng)子的分離.pdf

1、水稻(Oryza sativa L.)是全球最重要的糧食作物之一,其高產(chǎn)育種日益受到人們的重視。由于基因組小、生長(zhǎng)周期相對(duì)較短等特點(diǎn),水稻是禾本科作物基因組研究的重要模式作物,對(duì)其開展遺傳學(xué)研究具有重要意義。本研究通過(guò)圖位克隆技術(shù)對(duì)水稻密穗突變體進(jìn)行了基因定位,同時(shí)分離了水稻幼穗特異表達(dá)啟動(dòng)子。全文主要概述如下:
　　 1.從粳稻品種中花11組織培養(yǎng)后代中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)密穗突變體(densepanicle,dp1),表現(xiàn)為穗長(zhǎng)變短,

2、著粒密度顯著增加等特點(diǎn),對(duì)其后代進(jìn)行遺傳分析和表型鑒定,顯示出該突變體受一對(duì)不完全顯性基因控制。利用密穗突變體為母本與秈稻品種龍?zhí)馗雜交構(gòu)建F2分離群體,將密穗突變體基因定位在第2染色體標(biāo)記STS98和STS117之間的19kb區(qū)間內(nèi)。通過(guò)Rice Genome Annotation(http:／／rice.plantbiology.msu.edu／index.shtml)預(yù)測(cè)此區(qū)域只有1個(gè)基因LOC_Os02g32960,編碼一個(gè)未

3、知的保守蛋白,未發(fā)現(xiàn)與已知穗型發(fā)育相關(guān)的基因同源,表明DP1為一新基因。對(duì)基因功能進(jìn)一步驗(yàn)證將有助于水稻高產(chǎn)育種研究。
　　 2.利用水稻表達(dá)數(shù)據(jù)庫(kù)篩選了20個(gè)可能具有水稻幼穗特異表達(dá)特性的基因,分離了它們的啟動(dòng)子,將候選啟動(dòng)子克隆出來(lái)連接pCAMBIA1391Z載體并轉(zhuǎn)化到中花11愈傷組織中,在植株成熟后對(duì)各個(gè)組織進(jìn)行GUS染色,分析候選啟動(dòng)子的表達(dá)模式。結(jié)果篩選到了PS01和PS13兩個(gè)具有幼穗特異表達(dá)的啟動(dòng)子。運(yùn)用Gate