凋膜止崩方對(duì)子宮內(nèi)膜增生癥大鼠子宮組織中Fas-FasL表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：
　　 運(yùn)用凋膜止崩方乳化劑靶向給藥，觀察其對(duì)子宮內(nèi)膜增生癥大鼠子宮組織凋亡基因Fas/FasL系統(tǒng)的影響，從分子生物學(xué)水平研究凋膜止崩方靶向給藥治療ADUB的分子生物學(xué)效應(yīng)及機(jī)制。
　　 方法：
　　 健康雌性SD大鼠(180-200克)40只隨機(jī)分成4組(n=10)。A組：正常對(duì)照組、B組：模型組、C組：凋膜止崩方大劑量組、D組：凋膜止崩方小劑量組。除A組外，B、C、D三組大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù)，術(shù)后7日

2、，肌肉注射由高壓滅菌花生油稀釋的苯甲酸雌二醇(0.15mg/100g)，隔日一次，連續(xù)8周，停藥后第5天，模型組隨機(jī)取2只大鼠子宮組織，石蠟切片光鏡下觀察證實(shí)大鼠子宮內(nèi)膜增生癥造模成功。B組：雙側(cè)宮腔注入0.9％氯化鈉注射液0.3ml/側(cè)。C組：雙側(cè)宮腔注入凋膜止崩方大劑量，含生藥0.0005g/0.3ml/側(cè)。D組：雙側(cè)宮腔注入凋膜止崩方小劑量，含生藥0.00025g/0.3ml/側(cè)。A組：常規(guī)飼養(yǎng)8周，陰道脫落細(xì)胞涂片HE染色觀察，

3、于動(dòng)情前期10％水合氯醛溶液腹腔麻醉后開(kāi)腹，取出大鼠子宮組織。B、C、D組大鼠均于宮腔注藥后第2天，10％水合氯醛溶液腹腔麻醉后開(kāi)腹，取子宮組織。采用免疫組化SABC法檢測(cè)大鼠子宮組織中Fas/FasL蛋白表達(dá)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RealTimePCR簡(jiǎn)寫(xiě)作RT-PCR)檢測(cè)子宮組織Fas/FasLmRNA表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組大鼠子宮組織形態(tài)學(xué)變化：對(duì)照組：大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完整，腺體散在，腺腔

4、小，腺上皮細(xì)胞呈立方，間質(zhì)疏松；模型組：大鼠子宮內(nèi)膜上皮完整，增厚，腺體數(shù)量明顯增多，擁擠，相鄰腺體有背靠背現(xiàn)象，腺上皮有假?gòu)?fù)層現(xiàn)象，腺上皮細(xì)胞呈柱狀。凋膜止崩方大、小劑量組：內(nèi)膜有明顯剝脫。
　　 2.Fas/FasL蛋白的表達(dá)變化：對(duì)照組的正常組織即可見(jiàn)到Fas、Fasl的陽(yáng)性表達(dá)，模型組Fas的表達(dá)明顯降低，F(xiàn)asL的表達(dá)明顯升高，與對(duì)照組對(duì)比P<0.05；凋膜止崩方大、小劑量組Fas表達(dá)明顯升高，F(xiàn)asL表達(dá)明顯降低，與

5、模型組對(duì)比P<0.05；凋膜止崩方大、小劑量組之間無(wú)顯著性差異。
　　 3.Fas/FasLmRNA的表達(dá)變化：對(duì)照組的正常組織即可見(jiàn)到FasmRNA、FaslmRNA的陽(yáng)性表達(dá)，經(jīng)凋膜止崩方作用后，模型組FasmRNA的表達(dá)明顯降低，F(xiàn)asLmRNA的表達(dá)明顯升高，與對(duì)照組對(duì)比P<0.01；凋膜止崩方大劑量組FasmRNA表達(dá)升高及凋膜止崩方小劑量組FasLmRNA表達(dá)降低與模型組比P＜0.01；凋膜止崩方小劑量組FasmRN

6、A表達(dá)升高及凋膜止崩方大劑量組FasLmRNA表達(dá)降低，與模型組比P<0.05；凋膜止崩方大、小劑量組之間Fas、FaslmRNA表達(dá)均無(wú)顯著性差異。模型組Fas/FasL比值明顯降低，與對(duì)照組對(duì)比P<0.01；凋膜止崩方大、小劑量組Fas/FasL比值明顯升高，與模型組比有顯著差異；凋膜止崩方大、小劑量組之間無(wú)顯著性差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.采用去勢(shì)聯(lián)合雌激素負(fù)荷法可成功建立子宮內(nèi)膜增生癥模型。
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