2型糖尿病兔腦早期腦損傷SWI、DKI與病理對照性研究.pdf

1、目的:
　　本研究通過高脂高糖飼料喂養(yǎng)8周聯(lián)合兩次低劑量鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ）(65mg/kg)注射建立2型糖尿病(type2diabetes mellitus，T2DM)兔模型，評估所制備的模型是否具有人類T2DM的典型特征;對T2DM組及正常對照(normal control，NC)組兔腦進(jìn)行多時(shí)間點(diǎn)磁敏感成像(susceptibility weighted imaging，SWI)及彌散峰度成像(di

2、ffusion kurtosis imaging，DKI)，測量海馬區(qū)的相位值及MK值，并對兩組實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行海馬區(qū)的Aβ1-42及細(xì)胞凋亡檢測，將SWI、DKI與病理結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，評估SWI及DKI能否反映T2DM早期腦損傷的病理變化。
　　材料與方法:
　　1.隨機(jī)選取日系大耳白15只并分為兩組，NC組=5只，T2DM組=10只。對T2DM組實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行8周的高脂高糖飼料喂養(yǎng)，之后采用口服糖耐量試驗(yàn)(Oral gluco

3、se tolerance test，OGTT)及胰島素釋放試驗(yàn)評估T2DM組是否存在胰島素抵抗，在T2DM組實(shí)驗(yàn)兔出現(xiàn)胰島素抵抗時(shí)，進(jìn)行連續(xù)兩次低劑量STZ(65mg/kg)注射，之后進(jìn)行血糖檢測，以連續(xù)兩次空腹血糖大于7.0mmol/L認(rèn)為造模成功，計(jì)算造模成功率。對造模成功的T2DM組及NC組進(jìn)行體重、血糖、甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇(total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇（High

4、-density lipoprotein cholesterol，HDL-c）、低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol，HDL-c)的檢測。
　　2.取上述造模成功的T2DM組（7只）與NC組（5只），使用GE Signa HDxt3.0T磁共振掃描儀在2周、6周、10周進(jìn)行SWI及DKI掃描。每次掃描結(jié)束后，使用GE ADW4.6后處理工作站，選擇Functool2后處理軟件對

5、圖像進(jìn)行后處理，使用手繪ROI的方法，測量并分析右側(cè)海馬的相位值與MK值。
　　3.取右側(cè)海馬進(jìn)行Aβ1-42染色并進(jìn)行凋亡細(xì)胞檢測，使用Image-Pro Plus測量T2DM組與NC組實(shí)驗(yàn)兔右側(cè)海馬Aβ1-42的平均光密度值，通過TUNEL法檢測、高倍鏡計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞計(jì)算海馬區(qū)凋亡指數(shù)。
　　4.4.觀察T2DM組與NC組之間是否存在Aβ1-42的蓄積及細(xì)胞凋亡的差異，并將結(jié)果與SWI的相位值與DKI的MK值之間做相關(guān)性分

6、析;使用SPSS20.0對血糖、體重、TG、TC、HDL-c、LDL-c等計(jì)量數(shù)據(jù)進(jìn)行后處理。結(jié)果:
　　1.使用高脂高糖飼料喂養(yǎng)8周聯(lián)合兩次低劑量STZ(65mg/kg)注射可以成功誘導(dǎo)T2DM兔模型。造模前T2DM組較NC組OGTT及胰島素釋放實(shí)驗(yàn)顯示血糖及胰島素峰值后移，血糖及胰島素曲線下面積存在顯著性差異(P＜0.05)。造模后第2周生理生化指標(biāo)檢測結(jié)果顯示所建立的T2DM組較NC組血糖顯著性增高(p＜0.05);TG、L

7、DL-c含量增高(P＜0.05);HDL-c含量明顯降低(P＜0.05);而TC含量無顯著性差異(P＞0.05)。本課題對10只日系大耳白進(jìn)行造模，最后成功建立7只T2DM模型（成功率70％）。
　　2.兩組SWI及DKI結(jié)果顯示，T2DM組海馬區(qū)較NC組相位值逐次降低，MK值也逐次升高，但于第10周出現(xiàn)顯著差異(p＜0.05)。此時(shí)進(jìn)行海馬區(qū)Aβ1-42及細(xì)胞凋亡檢測，病理結(jié)果顯示，T2DM組較NC組出現(xiàn)顯著的Aβ1-42的沉積

8、(p＜O.05)，而細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果之間無顯著差異(p＞0.05);
　　3.相位值、MK值與病理結(jié)果相關(guān)性分析顯示，相位值與Aβ1-42之間存在明顯負(fù)相關(guān)性（r=-0.838，p＜0.05），與細(xì)胞凋亡之間不存在相關(guān)性(p＞0.05);而MK值與Aβ1-42與細(xì)胞凋亡之間不存在相關(guān)性(p＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.使用高脂高糖喂養(yǎng)8周聯(lián)合連續(xù)兩次低劑量STZ(65mg/kg)注射可以成功誘導(dǎo)T2DM兔模型，與