迷迭香葉中鼠尾草酸的分離純化及其生物活性研究.pdf

1、迷迭香（Rosmarinus officinalis L.）作為一種廣泛分布的藥用植物，其葉中含有多種生物活性物質(zhì)，其中鼠尾草酸具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗腫瘤、保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、護(hù)肝護(hù)胃、降低血糖血脂等一系列重要的藥理和生物活性，在食品、醫(yī)藥保健、化妝品和香料等方面具有廣泛的應(yīng)用。本文以迷迭香葉為原料，研究了迷迭香葉中鼠尾草酸的分離純化工藝。同時，通過自由基清除能力、還原力和平板二倍稀釋法實驗，評價了鼠尾草酸的抗氧化活性、抑菌活性。

2、r>　　以迷迭香葉為原料，采用3步驟復(fù)合提取純化方法制備鼠尾草酸，第一步:迷迭香葉經(jīng)超聲輔助乙醇提取，得到迷迭香提取物;第二步:迷迭香提取物經(jīng)超聲輔助正己烷提取和pH調(diào)節(jié)，得到鼠尾草酸粗品;第三步:鼠尾草酸粗品經(jīng)硅膠柱層析，得到鼠尾草酸純品。單因素試驗的結(jié)果表明:第二步操作的合理條件為:液固比20∶1（mL/g）、超聲頻率28 kHz、超聲時間40 min、超聲功率140 W;第三步操作的合理條件為:200～300目的硅膠40 g、洗脫

3、劑為乙酸乙酯∶石油醚=4∶7(v/v)、洗脫劑流速6 mL/min、負(fù)載量為0.3 g。通過此種方法得到的鼠尾草酸純度≥95％。
　　然后，在三步法的基礎(chǔ)上探索兩步法分離純化鼠尾草酸。以迷迭香葉為原料，采用兩步法分離純化鼠尾草酸，第一步:迷迭香葉經(jīng)超聲輔助乙醇提取，得到迷迭香提取物;第二步:迷迭香提取物經(jīng)硅膠柱層析，得到鼠尾草酸純品。單因素試驗的結(jié)果表明:第二步操作的合理條件為:200～300目硅膠50g、洗脫劑為乙酸乙酯∶石油醚

4、=4∶13(v/v)、洗脫劑流速4mL/min、負(fù)載量為0.5 g。通過此種方法得到的鼠尾草酸純度≥97％。同時，對實驗所得物質(zhì)進(jìn)行紫外、紅外、核磁、質(zhì)譜驗證，證明所得物質(zhì)為鼠尾草酸。
　　采用當(dāng)前公認(rèn)的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和鐵還原力3種體外抗氧化活性檢測與評價方法對鼠尾草酸與多種常見的合成抗氧化劑的抗氧化性能進(jìn)行比較。結(jié)果表明:鼠尾草酸具有比合成抗氧化劑PG、BHT、BHA，VE更好、僅次于TBHQ的抗

5、氧化性能，可在較低的濃度水平發(fā)揮較強(qiáng)的抗氧化能力，其清除DPPH自由基的IC50值為253μg/mL，清除ABTS自由基的IC50值為51.58μg/mL。
　　通過平板二倍稀釋法對鼠尾草酸與常見的3種抗菌劑新潔爾滅（苯扎溴銨）、氨芐青霉素鈉、紅霉素對6種不同菌種的最低抑菌濃度進(jìn)行測試和評價。抑菌實驗表明:鼠尾草酸具有廣譜抗菌性，特別是對大腸埃希氏桿菌、綠膿假單胞菌，其最低抑菌濃度分別為4和＜2μg/mL，表現(xiàn)出了比新潔爾滅、氨芐