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文檔簡介
1、目的:
在模擬人體生理條件下,以納米TiO2、納米TiO2/SiO2、納米TiO2/Fe3O4和納米TiO2/FA為研究對象,以溶菌酶、牛血紅蛋白和γ-球蛋白為模型蛋白,采用光譜法、Zeta電位法和比濁法等方法結合,研究納米TiO2及其復合物與三種蛋白的相互作用,同時探討其對三種蛋白毒性的影響。
方法:
采用紫外差光譜法觀察納米 TiO2及其復合物與三種蛋白作用前后紫外吸收光譜的變化;采用熒光光譜法研究納米
2、TiO2及其復合物對三種蛋白的熒光猝滅作用機制,并獲得結合常數(shù)、結合位點數(shù)等相關參數(shù)及作用力類型;利用同步熒光光譜法考察納米TiO2及其復合物對三種蛋白構象的影響;運用圓二色譜法進一步考察納米TiO2及其復合物對溶菌酶二級結構的影響;利用比濁法研究納米 TiO2及其復合物對溶菌酶活性的影響;采用Zeta電位法研究納米TiO2及其復合物與牛血紅蛋白和γ-球蛋白結合后表面電荷的變化。
結果:
紫外差光譜結果初步顯示,納米
3、TiO2及其復合物與溶菌酶、牛血紅蛋白和γ-球蛋白均發(fā)生了相互作用。熒光結果進一步證實,納米 TiO2及其復合物與三種蛋白均發(fā)生了相互作用,引起三種蛋白內源熒光顯著猝滅,且對三種蛋白的熒光猝滅機制主要為靜態(tài)猝滅,除了納米 TiO2/SiO2與溶菌酶的作用力為靜電作用外,其余兩者間的作用力均為氫鍵和范德華力;納米 TiO2及其復合物與三種蛋白均形成1:1基態(tài)復合物,298 K時,納米TiO2及其復合物和三種蛋白的作用力強弱不同,它們與溶菌
4、酶作用力順序為 TiO2/FA>TiO2/SiO2>TiO2/Fe3O4>TiO2,與牛血紅蛋白作用力順序TiO2/FA>TiO2/SiO2>TiO2>TiO2/Fe3O4,與γ-球蛋白作用力順序為TiO2/FA>TiO2>TiO2/SiO2>TiO2/Fe3O4。同步熒光結果表明,納米TiO2及其復合物對三種蛋白的構象產生不同程度的影響。圓二色譜結果證實,納米 TiO2及其復合物使溶菌酶的二級結構發(fā)生不同程度的改變。比濁法結果顯示,納
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