阿托伐他汀鈣短期預(yù)處理對兔心肌再灌注基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察阿托伐他汀鈣短期預(yù)處理對兔心肌再灌注基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的影響，并探討其心肌保護(hù)可能的分子機(jī)制。
　　 方法：采用傳統(tǒng)的結(jié)扎兔冠狀動脈左前降支的技術(shù)，建立兔心肌缺血再灌注模型。實驗對象：實驗動物為50只新西蘭大白兔。實驗分組：隨機(jī)分為5組，正常對照組10只(假結(jié)扎兔冠狀動脈左前降支)，再灌注安慰劑組10只(術(shù)前予安慰劑4mg/kg.d*3天)，阿托伐他汀鈣組10只(術(shù)前予阿托伐他汀鈣4mg/kg.d*3天)，培哚普利組1

2、0只(術(shù)前予培哚普利0.2mg/kg.d*3天)，阿托伐他汀+培哚普利組10只(術(shù)前予阿托伐他汀鈣4mg/kg.d*3天+培哚普利0.2mg/kg.d*3天)。指標(biāo)檢測：模型建立成功后處死動物，取心臟標(biāo)本行TTC形態(tài)學(xué)觀察心肌缺血面積、心肌梗死面積；通過免疫組織化學(xué)、RT-PCR兩種不同方法從不同層面觀察心肌組織中MMP-2、MMP-9、TIMP-2的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、TTC染色結(jié)果
　　 1.

3、1心肌缺血面積(ICS/LV％)：各模型組均明顯高于正常對照組；安慰劑組(38.61±1.53)、阿托伐他汀鈣組(37.5±1.5)、培哚普利組(39±2.18)、阿托伐他汀鈣+培哚普利組(39.3±1.93)各組間比較差異均無統(tǒng)計血意義。
　　 1.2心肌梗死面積(IFS/ICS％)：各模型組均明顯高于正常對照組；安慰劑組(50.0+2.00)明顯高于阿托伐他汀鈣組(29.67+2.08)、培哚普利組(35.33+1.53)以

4、及阿托伐他汀+培哚普利組(29+2.00)；阿托伐他汀鈣組明顯低于培哚普利組(P<0.05)、高于培哚普利+阿托伐他汀鈣組(P>0.05)；培哚普利組明顯高于培哚普利+阿托伐他汀組(P<0.05)。
　　 2、采用RT-PCR半定量方法檢測兔心肌中MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA、TIMP-2mRNA的表達(dá)結(jié)果
　　 2.1 MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA在正常兔心肌組織中可

5、見其呈低水平表達(dá)。兔心肌缺血再灌注后，MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)；TIMP-2 mRNA的表達(dá)輕度受到抑制。
　　 2.2兔心肌再灌注后，阿托伐他汀鈣組、培哚普利組、阿托伐他汀鈣+培哚普利組中，MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA的表達(dá)明顯受到抑制，均明顯低于安慰劑組[P<0.05]；阿托伐他汀鈣組的表達(dá)水平低于培哚普利組[P>0.05]、高于阿托伐他汀鈣+培哚普利組(P>0.05)；培哚普利組

6、的表達(dá)高于阿托伐他汀鈣+培哚普利組(P<0.05)。TIMP-2 mRNA的表達(dá)增加，各組均高于安慰劑組；阿托伐他汀鈣組的表達(dá)水平高于培哚普利組(P>0.05)、低于阿托伐他汀+培哚普利(P>0.05)；培哚普利組的表達(dá)低于阿托伐他汀鈣+培哚普利組(P>0.05)。
　　 3、采用免疫組織化學(xué)染色半定量方法檢測免心肌中MMP-2、MMP-9、TIMP-2的表達(dá)結(jié)果
　　 3.1 MMP-2、TIMP-2在正常兔心肌細(xì)胞胞

7、漿可見表達(dá)，MMP-9在正常兔心肌細(xì)胞間質(zhì)可見有表達(dá)，但平均光密度值呈低水平。兔心肌缺血再灌注后，MMP-2在兔再灌注心肌細(xì)胞胞漿、MMP-9在兔再灌注心肌細(xì)胞間質(zhì)的平均光密度值明顯增加；而TIMP-2在兔再灌注心肌細(xì)胞胞漿的平均光密度值呈現(xiàn)降低。
　　 3.2兔心肌再灌注后，MMP-2在兔再灌注心肌細(xì)胞胞漿、MMP-9在兔再灌注心肌細(xì)胞間質(zhì)的平均光密度值，各模型組明顯低于安慰劑組(P<0.05)；阿托伐他汀鈣組的表達(dá)水平低于培

8、哚普利組(P>0.05)、高于阿托伐他汀鈣+培哚普利組(P>0.05)；培哚普利組的表達(dá)高于阿托伐他汀鈣+培哚普利組。TIMP-2在心肌細(xì)胞胞漿的平均光密度值各組均高于安慰劑組；阿托伐他汀鈣組高于培哚普利組(P>0.05)、低于阿托伐他汀鈣+培哚普利預(yù)處理組(P>0.05)；培哚普利組的表達(dá)低于阿托伐他汀鈣+培哚普利組(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、MMP-2、MMP-9、TIMP-2在正常心肌組織中均有表達(dá)

9、，表達(dá)活性相對較弱。兔心肌缺血再灌注后，MMP-2、MMP-9被異常激活，表達(dá)活性明顯增強(qiáng)，而TIMP-2的表達(dá)則受到抑制。
　　 2、阿托伐他汀鈣、培哚普利短期預(yù)處理兔再灌注心肌后，明顯抑制MMP-2、MMP-9的異常激活，同時上調(diào)TIMP-2的表達(dá)。
　　 3、阿托伐他汀鈣、培哚普利短期預(yù)處理均可減輕缺血再灌注心肌的損傷，減小梗死區(qū)范圍，以阿托伐他汀鈣效果更明顯。阿托伐他汀鈣聯(lián)合培哚普利較單藥預(yù)處理更能有效抑制MMP