中國西部人群替諾福韋體內(nèi)藥代動力學(xué)研究.pdf

1、目的:建立HPLC-UV(high performance liquid chromatograph-ultraviolet detector,)方法測定中國西部人群血漿中替諾福韋含量;研究中國西部人群口服替諾福韋富馬酸酯(tenofovir dsoproxil fumarate,TDF)體內(nèi)的藥代動力學(xué)特征。
　　 方法:
　　 1.HPLC-UV方法學(xué)考察:色譜條件:Phecda C-18分析柱(4.6×250mm,

2、5μm);Phenomenex(R)C-18保護(hù)柱(4.0×3.0 mm,5μm);流動相A:含0.08％三乙胺的20 mmol·L-1磷酸二氫鉀水溶液(稀磷酸調(diào)至pH3.5);流動相B:甲醇;采用梯度洗脫;流速:1.0 mL·min-1;檢測波長270 nm;柱溫:35℃,進(jìn)樣體積100μL;分析時間30 min。從特異性、回收率、線性、精密度等方面進(jìn)行方法學(xué)考察。
　　 2.藥代動力學(xué)研究:對中國西部健康志愿者分組進(jìn)行三個周

3、期的隨機(jī)雙盲藥代動力學(xué)研究試驗(yàn)。
　　 (1)第一周期研究單次口服TDF體內(nèi)藥代動力學(xué)特征及其影響因素,分為TDF(300 mg)、TDF(300 mg)+恩曲他濱(200 mg)、TDF(300 mg)+恩曲他濱(200 mg)+脂肪餐三組,給藥后0、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24、36、48、72 h取血。
　　 (2)第二周期考察連續(xù)多次口服TDF的藥動學(xué)特征,包括TDF(300 mg

4、)×7d、恩曲他濱(200 mg)+TDF(300 mg)×7d、恩曲他濱(200 mg)+TDF(300mg)+脂肪食物×7d三組,每次給藥前及最后一次給藥后0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24、48、72h取血。
　　 (3)第三周期考察不同給藥間隔對中國西部人群口服替諾福韋藥動學(xué)參數(shù)的影響,分4組,A組:恩曲他濱(200mg)+TDF(300 mg)2次/w×4w,每周3和周6給藥,首次給藥

5、前,每周六給藥前以及最后1次給藥后0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24、36、48h、72h采血。B組:恩曲他濱(200 mg)+TDF(300 mg)qd×4w,第二周.第四周分別為周1、周3、周5各漏服1次。首次給藥前,每周日給藥前和最后1次給藥后24h取血。C組:恩曲他濱(200 mg)+TDF(300mg)qd×4w,第二周的周1、周3,第三周的周2、周5,第四周的周3、周4各漏服1次,首次給藥前,每周日

6、給藥前和最后1次給藥后24h取血。D組:TDF(300 mg)隔日給藥6次,每次給藥前、每次給藥后24h,以及最后1次給藥后0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24、36、48h、72h取血。
　　 血漿樣品采用固相萃取處理,通過HPLC-UV方法測定血漿中替諾福韋濃度,以DAS(Ver2.1.1)軟件計算藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　 結(jié)果:
　　 1本研究采用的HPLC-UV方法檢測血漿中替諾福韋

7、濃度,定量范圍在10.0～5000.0 ng·mL-1內(nèi),線性良好,替諾福韋和內(nèi)標(biāo)拉米夫定的保留時間(tR)分別為6.54min和7.74min,血漿樣品中替諾福韋日內(nèi)、日間精密度(RSD%)均小于10%,平均提取回收率為72.8%～95.5%,平均相對回收率為105.4%～110.5%;標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:Y=0.0027X-0.0362(r2=0.9994,n=5)。
　　 2替諾福韋在中國西部健康人群體內(nèi)的藥代動力學(xué)符合二室開

8、放模型,單次口服TDF的t1/2為18.78±3.28 h,tmax為1.05±0.16 h,Cmax為290.71±63.21 ng·mL-1,AUC0-72與AUC0-∞分別為1871.60±377.00和2284.16±373.54μg·h·L-1,CL/F為2.25±0.39 L·h-1·kg-1。
　　 恩曲他濱合用使TDF的Cmax明顯增加,提高約44%,達(dá)峰延遲,t1/2縮短,AUC明顯提高約70%。恩曲他濱合用加

9、高脂飲食后替諾福韋的藥動學(xué)參數(shù)與兩藥合用時相似,但使達(dá)峰時間延后更明顯。
　　 TDF連續(xù)多次單獨(dú)給予的藥動學(xué)參數(shù)與TDF單次單獨(dú)給藥沒有明顯差異;兩藥合用連續(xù)多次給予,與兩藥聯(lián)合單次給藥的藥動學(xué)參數(shù)相似;TDF+恩曲他濱+高脂餐連續(xù)給藥組的藥動學(xué)參數(shù)與其單次給予同樣沒有明顯差異。
　　 每周2次給藥,TDF穩(wěn)態(tài)時血谷濃度低于檢測限,而最后一次給藥后的藥動學(xué)參數(shù)與兩藥聯(lián)合單次給予組的藥動學(xué)參數(shù)無顯著性差異;連續(xù)給藥達(dá)穩(wěn)態(tài)

10、后,每周漏服1次或漏服2次的穩(wěn)態(tài)血谷濃度差異不明顯;隔日給藥一次,TDF給藥后24h穩(wěn)態(tài)血谷濃度可達(dá)每日一次穩(wěn)態(tài)血谷濃度的80%,48h約為40%。
　　 結(jié)論:
　　 1.本研究采用的HPLC-UV檢測血漿中替諾福韋的方法特異性、線性、精密度良好,回收率達(dá)到檢測要求,操作相對簡單方便、準(zhǔn)確可靠,適合用于中國西部人群血漿中替諾福韋濃度的常規(guī)監(jiān)測。
　　 2.TDF無論單次還是連續(xù)多次單獨(dú)給予的藥動學(xué)參數(shù)特征在中國

11、人群與國外人群中基本一致。
　　 3.恩曲他濱能使中國人群替諾福韋的生物利用度增加,達(dá)峰延遲,t1/2縮短;在兩藥合用的基礎(chǔ)上,脂肪飲食僅使中國人群的替諾福韋達(dá)峰時間延后更明顯,對其他參數(shù)無顯著影響。
　　 4.連續(xù)用藥達(dá)穩(wěn)態(tài)后,每周漏服1次或2次的預(yù)防用藥對HIV高危人群的保護(hù)可能沒有明顯影響;隔日給藥一次,替諾福韋穩(wěn)態(tài)血谷濃度約為每日一次給藥穩(wěn)態(tài)血谷濃度的40-80%,而每周兩次的給藥血藥濃度太低,需要進(jìn)行靶細(xì)胞藥物